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SDS-PAGE凝胶的制备方法

崔俊涛 |  2021-12-10  | DOI: 10.21769/BioProtoc.v981
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视频简介1、清洗玻璃板。食指中指无名指玻璃板划圈洗。用蒸馏水冲洗干净后晾干。玻璃板对齐后放入夹子中卡紧,以免漏胶。
2、制备分离胶。灌胶时,枪头沿玻璃板一角放出,溶液缓慢加入到装配好的玻璃板中,高度约为6cm左右,预留1.5 cm高度配制浓缩胶。然后胶上加一层无水乙醇,液封后的胶凝得更快。(灌胶时开始可快一些,胶面快到所需高度时要放慢速度。操作时胶一定要沿玻璃板流下,这样胶中才不会有气泡。加水液封时要很慢,否则胶会被冲变型。)室温放置0.3-1小时左右至聚合完全。当水和胶之间有一条折射线时,说明分离胶已凝,此时即可倒去胶上层无水乙醇并用吸水纸将水吸干.
3、制备浓缩胶。将剩余空间灌满浓缩胶然后将梳子插入浓缩胶中。灌胶时也要使胶沿玻璃板流下以免胶中有气泡产生。插梳子时要使梳子保持水平。凝胶聚合约0.3-1小时左右。催化剂过硫酸铵(APS),最好现配现用。加速催化剂:四甲基乙二胺(TEMED)需要避光保存。
查看SDS-PAGE完整配比表请点击查看pdf
  • 评审评语摘选
视频清晰、实用。建议变换机位,不使用侧面拍摄,这样视图会更好。PAGE胶有很多比例的配方,建议在视频中一并体现,这样会更具参考性。【上方视频简介中可查看作者整理的完整的配比表!】
实验操作过程明确,说明详尽。
视频内容过于繁琐。