一、视频摘要
Dot
blot实验包括蛋白质、DNA、RNA
dot blot实验,又称为斑点印记,用于半定量检测相应物质的含量。本实验主要展示的是DNA
6mA dot blot实验,首先使用离心柱法提取细胞基因组DNA,然后通过dot
blot法检测基因组中的DNA
6mA含量。
二、关键词
Dot
blot,DNA,斑点印记,6mA
三、实验样品信息,试剂、耗材或仪器
1. 样品信息
肝细胞癌Huh7细胞系
2. 试剂和耗材
DNA提取试剂盒(天根),DNA
6mA抗体(Synaptic
system),山羊抗兔二抗(Abclonal),ECL显色液(碧云天),脱脂奶粉(碧云天),NC膜
3. 仪器和软件
显影仪(BIO-RAD)
四、实验操作
1.使用天根DNA提取试剂盒提取细胞基因组DNA
2.将DNA进行稀释配平后变性
3.点样,风干后紫外交联,再用脱脂奶粉进行封闭
4.一抗4℃封闭过夜
5.TBST洗膜后二抗室温封闭1小时
6.显影
五、注意事项
膜要风干,否则滴加DNA容易昀开
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