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体内成熟卵母细胞和受精卵收集
Collection of in vivo Mature Oocytes and Fertilized Oocyte
Authors:  樊娜娜赵宇, 欧阳振, 李昊, 赖良学 and date: 12/20/2022, view: 1036, Q&A: 0
最后一次四烯雌酮给药15-17小时后,肌肉注射1500 IU 的马绒毛膜促性腺激素(eCG: Sigma, G4877) 诱导卵子成熟。 用冲卵液从输卵管子宫端至伞端冲取回收成熟卵母细胞或受精卵。采卵完毕后,将输卵管、子宫复位,用37℃灭菌生理盐水湿润子宫,冲去凝血块。按腹膜、皮下筋膜、皮肤三层缝合。 hCG注射46-54小时后,从输卵管冲取回收成熟卵母细胞。获取受精卵需要在注射hCG 24h后查情,在发情中期选取体重大小适宜的健康公猪进行配种,配种后 24~36h通过输卵管冲取回收受精卵。 2.0mm玻璃管(WPI)实验步骤在饲料中添加四
犬体细胞克隆
Canine Somatic Cell Nuclear Transfer
Authors:  王晓民赖良学 and date: 12/20/2022, view: 952, Q&A: 0
... ,收集体内成熟的卵母细胞;用0.1%的透明质酸酶脱去卵母细胞上的颗粒细胞;将脱去颗粒细胞的卵母细胞用Hoechst染色5 min;染色完成后清洗胚胎,并将胚胎转移到胚胎操作液中;在倒置显微镜下用固定针固定好卵母细胞 结果与分析重构胚胎的融合率低,可能与卵母细胞的成熟程度或是融合的条件和参数有关;体细胞克隆效率低,可能与体细胞的类型和整个克隆操作效率有关。 TransferMan