猪体细胞核移植
Porcine Somatic Nuclear Transfer
Authors: 樊娜娜欧阳振,
王教伟,
赵宇,
赖良学 and
date: 11/20/2022,
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Q&A: 0
... 猪卵母细胞的体外成熟成熟液准备
24孔板，每空0.5 ml成熟液，以石蜡油覆盖后置于CO2培养箱中（5% CO2，饱和湿度，39℃）平衡3小时以上。 结果与分析卵母细胞体外成熟率达80%以上，胎儿成纤维细胞与卵母细胞融合率因传代次数不 同略有不同，在70-90%之间。胎儿成纤维细胞克隆胚胎囊胚发育率为20%左右。 成熟卵母细胞的去核
核移植前需要对
猪体外受精
Pig In Vitro Fertilization
Authors: 樊娜娜欧阳振,
李昊,
赖良学 and
date: 11/20/2022,
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调整精子密度为40000精子/300 μl.将装有精子的离心管45度角放置于培养箱中2小时。体内或者体外成熟的猪卵母细胞，用透明质酸酶消化去掉周围的卵丘细胞。 将去卵丘的卵母细胞转移到猪受精液中洗涤3次。将洗涤好的卵母细胞和稀释好的15μl精子转移到平衡好的受精液中，轻轻混合，每孔卵母细胞不超过80枚。将精子和卵母细胞在培养箱中共孵育4-6小时。