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日期
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小鼠受精卵原核注射及胞浆注射
Pronuclear Microinjection and Cytoplasmic Microinjection in the Mouse
Authors:
唐蔚
李周结
,
俞骞
,
陈子尘
,
王倩雯
,
陈国元
,
丁一夫
,
吴宝金
and
date:
09/20/2022,
view:
3053,
Q&A:
0
测试调整完压力后,就可以开始
注射
,为了最大化存活率,应尽可能的减少针停留在
受精卵
内部的时间,以避免
受精卵
无法封口导致死亡。重复操作直至所有
受精卵
注射
完毕。 将
注射
后的
受精卵
移回KSOM培养液中继续培养,刚
注射
完的
受精卵
会残留CB-HCZB,因此在过夜培养前需要反复洗涤几次。
注射
完毕,将
受精卵
放回KSOM培养液中,在恒温培养箱中继续培养,吸取下一批
受精卵
继续进行,直到注完为止。将
受精卵RNA或DNA显微注射
Fertilized Oocyte Injection
Authors:
樊娜娜
欧阳振
,
王教伟
,
张全军
,
赖良学
and
date:
12/20/2022,
view:
1258,
Q&A:
0
用无RNA 酶的枪头将RNA注入
注射
针中,将固定针和
注射
针安装到显微操作仪上,将40-60 个
受精卵
移入操作滴中。用固定针吸住
受精卵
,将极体调整到6或者12点钟方向。
注射
针穿破透明带和质膜进入胞质,将RNA
注射
入胞质,用
注射
泵对每个胚胎注 2-10 pl 的RNA,
注射
后
受精卵
有明显臌胀。若
注射
物为DNA则将DNA
注射
入雄原核。
注射
完的
受精卵
在胚胎培养液中洗
长爪沙鼠胚胎显微注射(胞浆注射)
Embryo Microinjection (Cytoplasm Injection) in Mongolian Gerbils
Authors:
郭萌
王妍
,
李长龙
,
杜小燕
,
陈振文
and
date:
08/13/2021,
view:
1685,
Q&A:
0
胞质显微
注射
在下午2时左右(沙鼠原核期
受精卵
比例最高),将上午10时左右培养的沙鼠
受精卵
取出,在M2培养基中清洗一次后,用口吸管将
受精卵
转移到显微
注射
的M2微滴中,用显微
注射
仪将Cas9/gRNA体系
注射
到长爪沙鼠
受精卵
的胞质中 显微
注射
完成后,用口吸管将存活的
受精卵
转移到新的M2微滴中,在CO2培养箱中继续进行培养或进行胚胎移植。 感谢清华大学实验动物中心常在主任和中国科学院动物研究所实验动物中心多曙光主任在
体内成熟卵母细胞和受精卵收集
Collection of in vivo Mature Oocytes and Fertilized Oocyte
Authors:
樊娜娜
赵宇
,
欧阳振
,
李昊
,
赖良学
and
date:
12/20/2022,
view:
1042,
Q&A:
0
获取
受精卵
需要在
注射
hCG 24h后查情,在发情中期选取体重大小适宜的健康公猪进行配种,配种后 24~36h通过输卵管冲取回收
受精卵
。胚胎冲取操作如下:供体猪手术前应停食12-24小时,可适当饮水。 皮肤缝合后,在伤口周围涂碘酒,并肌肉
注射
青链霉素防止创口感染发炎。结果与分析经过超数排卵后,一头供体母猪可获得20-30枚卵母细胞或者
受精卵
。 eCG
注射
82小时后,
注射
1000IU人绒毛膜促性腺激素(hCG: Intervet CH4751),促进排卵。hCG
注射