原位杂交是检测组织或细胞上感兴趣的基因的表达水平和位置的有效方法。 该方案中提供的方法是用于原位杂交的合成反义探针的详细描述。 材料和试剂CI（氯仿：异戊醇= 24:1）NaOAcEtOHLiClDEPC H 2 ORNasin Plus蛋白酶抑制剂（Promega Corporation，目录号：N2611）70％乙醇PCI（苯酚：氯仿：异戊醇= 25：24：1，体积，Sigma-Aldrich，目录号：P3802）糖原（QIAGEN，目录号：158930）DIG RNA标记试剂盒（Roche Diagnostics，目录号：11175025910）快速旋转柱（Roche Diagnosti

... 2.15预处理抗地高辛碱性磷酸酶抗体(1:50溶于PBSTw溶液)用于第二天与探针的地高辛标记进行后续免疫显色反应。将抗体稀释液加入第2.9步预留的的果蝇组织，置于摇床上4 °C过夜。 2.19去除PBSTw溶液，加入150 μl预处理的抗地高辛碱性磷酸酶抗体与探针的地高辛标记反应 (将预处理的抗体1:40稀释于PBSTw溶液中，抗体终浓度为1:2,000)，置于摇床上4 °C过夜。 预留一部分果蝇组织用以预处理抗地高辛碱性磷酸酶抗体(见步骤2.15)。2.10加入50% PBSTw/50% Hy