材料与试剂M199（Invitrogen）FBS（Gibco）异氟烷（瑞沃德）手术器械（国产）手术创巾（国产）双抗P/S（Gibco）生理盐水（格美研）胚胎移植管（Kendall）口吸管（自制）玻璃管（国产）培养皿（Corning）仪器设备体视显微镜（Olympus）实验背景由于犬独特生殖生物学特性，其辅助生殖技术一直发展很缓慢。犬的一个生殖周期，包括大约1周的发情前期和发情期，随后是2个月的间情期。间期之后是一个可变的（2-10个月）乏情期，导致每年只能排卵1-2次。尽管数十年来一直在研究驱使发情的传统生殖激素（促性腺激素、雌二醇、孕酮），但对乏情期的可变持续时间和最终终止浓度并不清楚。科研

实验目的利用CRISPR/Cas9系统对靶基因 (蝴蝶：white；萤火虫：Abd-B) 进行编辑，观察基因编辑后的表型变化，验证靶基因的功能。 种子区是紧接着NGG结构的12-15 bp的序列，原则上种子区在全基因组上出现的次数越少，目的基因编辑脱靶的可能性就越低。最后，选取2-3个位于exon上的靶点进行后续实验 (表1)。 蝴蝶基因编辑操作流程图双针注射 使用TransferManNK2和FemtoJet双针显

此外，由于胎儿成纤维细胞具有高增殖率，因此被广泛用于生产转基因克隆动物。因此，胎儿成纤维细胞被认为是在几个物种中产生克隆后代的最合适的供体细胞。