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果蝇成蝇脑原位杂交实验方案
In situ
Hybridization in Adult
Drosophila
Brain
Authors:
李美霞
温省云
,
许孟博
,
崔名扬
,
刘力
and
date:
06/20/2019,
view:
3799,
Q&A:
0
第一天 一、
解剖
和固定 (保持无RNA酶污染) 以做5孔
成
蝇
脑
原位杂交为例,第一天需要的溶液量:在预冷的1× PBS中
解剖
成
蝇
脑
,用样品勺把
解剖
好的
成
蝇
脑
转移到固定液中。 尽量
解剖
干净一些,去掉所有能看到的气囊丝。在培养板上选择5个孔,每个孔中加入0.6 ml 8%甲醛溶液,把培养板放在冰上。
解剖
一个固定一个,每个孔中放5个
成
蝇
果蝇成蝇大脑的解剖与免疫组化
Anatomy and Immunochemistry of the Whole-mount Brain of Adult
Drosophila
Authors:
杨扬
周鸣敏
,
李岩
and
date:
06/20/2019,
view:
10525,
Q&A:
1
说明86E01可实现成
蝇
脑部部分神经胶质细胞的表达,但如果要实现特定
脑
区神经胶质细胞的表达,还需进一步改造基因,从而研究特定
脑
区神经胶质细胞的功能。图3.
成
蝇
大脑的GFP遗传标记与免疫组化. 2) 一个
成
蝇
大脑的
解剖
建议在3 min内完成,不宜超过5 min,以保持大脑的正常形态及活性:若3 min内可完成,则生理液可提前置于冰上,
解剖
时不需在冰上进行;若速度过慢则建议直接在冰上进行大脑
解剖
取300 μl固定液
以MARCM标记单细胞在果蝇神经系统的应用
Labeling Single Cells by Mosaic Analysis with a Repressible Maker (MARCM) in
Drosophila
Nervous System
Authors:
张颢馨
周雅惠
and
date:
06/20/2019,
view:
7591,
Q&A:
0
... 收集羽化后2~5天的
成
蝇
,在新鲜配制的4%聚甲醛/磷酸盐缓冲生理盐水中进行
解剖
以获取
成
蝇
的大脑,并将
解剖
出的
成
蝇
脑
立即放入冰上的微量离心管。 此离心管在整个
解剖
过程中必须固定在碎冰上,以保持
成
蝇
脑
的新鲜程度。
解剖
完所有样本后,将离心管移至室温下,置于3D旋转震荡器水平均匀反应20分钟。 待温水浴后,将果蝇培养管放回25 °C培养箱,静待幼
果蝇大脑三维建模与分析以量化神经性状
Quantitatively Analyzing Morphological Phenotypes of Neurons and Neuropils through Three-dimensional Reconstruction of
Drosophila
Brains
Authors:
蔡国鼎
刘南甫
,
周雅惠
and
date:
06/20/2019,
view:
5641,
Q&A:
0
... , model: LSM780)软件Imaris软件 (Bitplane; http://www.bitplane.com/company)实验步骤免疫荧光染色标定的神经组织样本制备 本实验样本为果蝇
成
蝇
大脑 ,样本在新鲜制备的4%聚甲醛/磷酸盐缓冲生理盐水中
解剖
并在室温下进行组织固定。 第二抗体溶液 (见溶液配方)仪器设备电脑 (具独立显示卡的高阶电脑,建议规格如下:3GHz dual-core CPU, 8GB RAM, 以及AMD Radeon R7 250 2G以上等级显示卡)
解剖
显微镜 20%聚甲醛则可稀
Intact
in situ
Preparation of
Drosophila melanogaster
Lymph Gland for Comprehensive Analysis of Larval Hematopoiesis
原位完整制备黑腹果蝇血淋巴作幼虫造血功能综合分析
Authors:
Diana Rodrigues
K. VijayRaghavan
,
Lucas Waltzer
,
Maneesha S. Inamdar
and
date:
05/20/2021,
view:
4103,
Q&A:
0
... 形成LG的血细胞祖细胞衍生自胚胎背中胚层,克隆分析表明存在
成
血
成
血管细胞前体细胞,可产生LG血细胞和背血管细胞(Mandal等,2004)。 ...