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小鼠乳腺干细胞流式分选
FACS Sort Mouse Mammary Stem Cells
Authors:  宋文倩曾艺 and date: 11/20/2019, view: 4196, Q&A: 0
离心,5%的胎牛血清重悬沉淀,通过40 μm滤膜过滤细胞,做好分选准备。进行流式分选,用含50%胎牛血清的PBS承接分选到的细胞。15 ml管中预放7~8 ml承接液。 流式分选乳腺干细胞取出少量细胞进行单色抗体染色 (约50 μl),用于FACS时做颜色补偿。剩余细胞加入一抗染色,冰上孵育20 min。期间轻弹细胞沉淀以使细胞能够充分染色。 流式抗体来源及使用浓度Trypsin-EDTA 0.05% phenol red (invitrogen, catalog nu
小鼠肠道干细胞流式分选
FACS Isolation of Mouse Intestinal Stem Cell
Authors:  陈世阳陈剑峰 and date: 11/20/2019, view: 6905, Q&A: 0
流式分选得到Lgr5-GFPhigh的肠道干细胞和GFPlow的祖细胞。注意事项实验过程中需要用到的PBS应精确配比,高温灭菌并预冷。 电动移液器 (Eppendorf Easypet 3)37 °C水浴锅 (上海精宏, catalog number: DK-420)4 °C 离心机 (Eppendorf, model: 5804R)流式分选仪器 将制备好的单细胞悬液转移至FACS管中,通过Aria III进行流式分选,gating strategy: 7-AAD- CD45-Ter11
骨骼肌肌肉干细胞流式分选
Isolation of Skeletal Muscle Stem Cells by FACS
Authors:  韩莉莉胡苹 and date: 11/20/2019, view: 9927, Q&A: 0
仪器设备移液枪眼科剪尖头镊子手术刀ZWY恒温水浴培养振荡器 (上海智城分析仪器制造有限公司,model: ZWF-110X30)水平离心机 (Thermo Scientific,model: labofuge 400 R)高速流式细胞分选仪 感谢中国科学院生物化学与细胞生物学研究所细胞平台的边玮、王雪冬、丁宇波、俞珺璟老师在分选仪器使用中的帮助。 CD31?CD45?Sca1?VCAM+的细胞群分选. A. P5为CD31?CD45?Sca1?的细胞群。B. P6为CD31?CD45?Sca1?VCAM+的细胞群。C. 四
小鼠背根神经节细胞类型特异神经元流式分选
Isolation of Cell-Type-Specific Neurons in Mouse Dorsal Root Ganglion by FACS
Authors:  姜博文鲍岚, 王斌 and date: 11/20/2019, view: 12437, Q&A: 0
将制备好的细胞悬液通过细胞滤网过滤后,转移至细胞流式管中。SONY MA900流式分选仪进行分选,为了减少分选的假阳性细胞,首先采取死细胞的分选去除。 为了保证分选细胞不被污染,分别用75%乙醇、无菌水和1× PBS (加入双抗) 冲洗流式分选仪5分钟。利用SONY MA900流式分选分选时可以根据每次分选的不同细胞比例,采取不同的分选程序完成
酵母流式细胞荧光分选流程
Fluorescence Activated Cell Sorting of Yeast Cells Using Flow Cytometry
Authors:  李婷婷李典范 and date: 11/20/2019, view: 10072, Q&A: 0
3.4流式分选细胞:用0.5 ml缓冲液A重悬细胞,用40 μm滤网过滤细胞后,进行流式分选。根据GFP的荧光信号选择FITC通道,分选FITC阳性的细胞群。流式分选过程参见流式细胞仪的操作手册。 基于流式检测的克隆筛选 在分选出来的细胞中,不同细胞表面的纳米抗体与GFP的结合特异性和亲和力不同,我们希望能够筛选到高亲和力的克隆。因此,在分选结束后,我们需要再利用流式检测筛选单克隆
应用流式细胞技术分选小鼠各级精母细胞的方法
Isolation of Mouse Spermatocytes Using Flow Cytometry
Authors:  林震陈瑶, 张玉洁, 童明汉 and date: 11/20/2019, view: 7237, Q&A: 0
流式分选后各级精母细胞的验证. 将流式分选的不同群体细胞进行核铺展,并结合免疫荧光进行验证。 流式分选小鼠精母细胞的设门策略四. 流式分选在即将上机时,向细胞悬液中加入PI (1 μg/106细胞),用40 μm滤网过滤至流式管中。 分选后细胞得率低: 机器状态问题。 注:检查流式细胞仪液流的稳定性、drop delay参数及分选电压等。 接收液问题。
小鼠类肝前体细胞的流式分析与分选
Fluorescence Activated Cell Sorting of Mouse Hepatic Progenitor-like Cells
Authors:  崔磊李露 and date: 11/20/2019, view: 8527, Q&A: 0
肝细胞沉淀用含5% FBS的1x PBS重悬,用40 μM孔径无菌滤膜过滤,准备流式分析和分选。采用高速流式细胞分选仪,利用100 μm喷嘴进行分选。 关于分选:由于小鼠肝细胞本身体积较大,直径20~30 μm,因此上样前必须将肝细胞仔细吹打均匀并用40 μm孔径的滤膜过滤,以免细胞黏在一起堵塞流式分选仪的管道;分选时应该选择100 μm的喷嘴,用小于的 结果与分析小鼠肝脏在受到DDC慢性损伤7天后,SOX9阳性的类肝前体细胞会大量出
干细胞类器官形成能力检测
Organoid Formation Efficiency Assay of Stem Cells
Authors:  郭旺昕田维新, 韩帅, 赵宏伟, 高栋 and date: 11/18/2021, view: 2521, Q&A: 0
... 流式分选抗体染色1)加入1 ml预冷的流式分选缓冲液重悬细胞沉淀,而后放入室温离心机中300 × g离心3 min,移除上清。 2)用300 μl预冷的流式分选缓冲液稀释所需染色的流式抗体 (DAPI、EpCAM-PE/Cy7、Tacstd2-APC),并将配好的含有流式抗体的流式分选缓冲液加入细胞沉淀中,重悬细胞沉淀并吹打混匀 5)用500 μl预冷的流式分选缓冲液重悬细