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细菌的流式检测
Flow Cytometric Analysis of Bacteria
Authors:  闵娟关武祥 and date: 11/20/2019, view: 9443, Q&A: 0
失败经验因细菌比较小,在流式检测时为减少杂信号的影响,通常会加入FSC-H和FSC-A的散点图去除粘连。细菌浓度需要控制。 致谢本文实验方案改编自 Sun等 (2019),所述零价铁基微球和含菌污水由华中师范大学化学学院提供,相关流式细胞检测方法由中科院武汉病毒所分析测试中心建立并完成。 FCM检测:FCM检测光源为氩灯 (激发光波长488 nm)。设前向角 (FSC) 和侧向角 (SSC) 的信号值为对数放大,FSC反映了细胞直径的大小,SSC反映了细胞内颗粒的复杂程度。 FITC通道
Treg细胞亚群的流式检测
Subset Analysis of Mouse Tregs by Flow Cytometry
Authors:  朱雪平周旭宇 and date: 11/20/2019, view: 8176, Q&A: 0
注:流式上机检测之前一定要使用200目白色尼龙网过滤细胞以除去死细胞以及细胞碎片,否则容易堵塞流式细胞仪管道。 注:1) 流式上机检测之前一定要使用200目白色尼龙网过滤细胞以除去死细胞以及细胞碎片,否则容易堵塞流式细胞仪管道。 加入300 μl 1x Perm缓冲液重悬细胞,用200目白色尼龙网过滤细胞至流式管中。 流式细胞术检测细胞荧光表达情况。 Invitrogen, catalog number: C11965500CP)2)
细胞外囊泡的流式检测
Flow Cytometric Analysis of Extracellular Vesicles
Authors:  闵娟关武祥 and date: 11/20/2019, view: 7793, Q&A: 0
流式细胞仪对EVs的检测尤为关键,普通流式检测检测下限为200~500 nm,无法检测小的微囊泡及外泌体 (30~150 nm),因此在分析此类微粒时,目前有通过紫光侧向角散射光替代前向散射光检测以及其他超高灵敏流式检测装置的流式细胞仪 本方案旨在通过电穿孔的策略将超小、近红外磁性量子点载入循环微囊泡,利用流式细胞仪实现微囊泡的定量检测 (Yu等,2017)。收集口腔癌患者的静脉血
抗体滴定的流式检测
Antibody Titration by Flow Cytometry
Authors:  刘懿蕃华兆琳, 侯百东 and date: 11/20/2019, view: 10271, Q&A: 1
将各单染管依次上样,调整电压,确认阳性群低于各荧光通道的最高检测范围。依次记录各单染管。结果与分析实验结果见图1。图1. 三、 上机检测流程依次创建 New Folder> Experiment > Specimen > Tube。在Parameters 窗口中保留:Alexa Fluor 700。 材料与试剂5 ml 流式管可放置5 ml流式管的试管架2~3个解剖工具和烧杯六孔板枪尖若干:2 μl、20 μl、100 μl、200 μl 和 1 ml 40 μm过滤筛15 ml离心管1 ml带针注射器
海洋病毒的流式检测
Flow Cytometric Analysis of Marine Virus
Authors:  卢余盛钟春莲, 贾力, 陈建明 and date: 11/20/2019, view: 4441, Q&A: 0
上样检测:6.1流式细胞仪校准和实验模板建立:在进行样本检测之前,先按照标准程序对流式细胞仪进行开机、无菌清洗,并通过CS&T微球对流式细胞仪进行追踪校准和稳定性检测。 结果与分析Brussaard等通过流式细胞仪对14种不同类型的海洋病毒进行检测 (Brussaard,2004)。 流式细胞仪检测白化 (White Syndrome,WS) 珊瑚和健康珊瑚中病毒样颗粒. A. 作为参考,培养的EhV病毒 (
Treg细胞功能的流式检测
Functional Analysis of Mouse Tregs by Flow Cytometry Analysis
Authors:  朱雪平周旭宇 and date: 11/20/2019, view: 10429, Q&A: 0
根据实验需要,体外培养3~6天,收集Treg进行流式检测其增殖活化情况。 37 °C,5% CO2条件下培养72小时,收取细胞并进行流式检测。 具体操作实验流程见图1。图1. Treg细胞体外抑制实验流程图结果与分析Treg细胞体外增殖活化分析,见图2。图2. Treg细胞体外抑制试验中,要注意T responder细胞的来源,否则不能检测出Treg细胞对T细胞的增殖抑制的能力。 运用BD FACSAria III流式细胞分选仪分选CD4+GFP+CD62Lhi的细胞至含有20% FBS
病毒的流式检测
Flow Cytometric Analysis of Virus
Authors:  闵娟关武祥 and date: 11/20/2019, view: 7427, Q&A: 1
病毒经2%的多聚甲醛固定后直接上机检测。二、流式细胞术检测慢病毒流式细胞仪的参数设置:建立双参数FSC/SSC散点图和EGPF/SSC双参数散点图,根据其信号调节光电倍增管电压,得到合适的流式图。 在正式检测病毒之前,我们首先利用流式分析仪检测不同尺寸的商品化聚苯乙烯绿色荧光微球,以此验证流式细胞仪对微纳米尺度的颗粒的分析性能 (Vlasak等,2016;Bonar和Tilton,2017)。 流式细胞仪GFP荧光通
B细胞抗体类别的流式检测
The Detection of B Cell Antibody Isotype by Flow cytometry
Authors:  刘懿蕃华兆琳, 侯百东 and date: 11/20/2019, view: 8069, Q&A: 0
,即可用于流式细胞仪检测。 五、 上机检测流程依次创建 New Folder> Experiment > Specimen > Tube。 将各单染管依次上样,调整电压,确认阳性群低于各荧光通道的最高检测范围。依次记录各单染管,重新命名补偿名称,并链接应用补偿,记录样本管。结果与分析实验结果见图1。图1. 野生型小鼠Qb免疫11天后通过富集Qb-AF647+细胞,从中gate出发生了类别转换的记忆细胞,检测各Ig亚型的比例 (Liao等,2017) 失败经验使细胞和所用到的缓冲液和试剂尽
T细胞增殖的流式检测 (CFSE稀释法)
Analyzing T Cell Proliferation through CFSE Dilution Assay
Authors:  戚馨月杨选明 and date: 11/20/2019, view: 31874, Q&A: 2
流式检测T细胞CFSE荧光强度 未被CFSE标记的脾脏细胞样品,选择CD3+细胞群分析CFSE荧光强度,如图2:图2.未标记T细胞CFSE荧光强度 CFSE标记后的脾脏细胞,选择 流式检测OTII多肽刺激 (左) 与无刺激 (右) T细胞CFSE荧光强度 OTII刺激脾脏细胞24 h时,未见不同荧光强度的峰,只有单一CFSE高强度峰,此时T细胞还未大量增殖;从第48 分别在第24 h、48 h、72 h、96 h取细胞用于流式检测,加入150 μl/
海洋微生物中DNA含量的流式检测
DNA Content Analysis in Marine Microorganisms by Flow Cytometry
Authors:  钟春莲卢余盛, 贾力, 陈建明 and date: 11/20/2019, view: 3933, Q&A: 0
如果样本不能在采集12小时内完成检测,可用移液器转移已固定好的水样于冻存管内4 °C保存,一个月内完成流式检测。 重复步骤7,将多余的PI染料去除,预留200 μl溶液上机检测。在流式细胞仪上,先用未染色的微生物悬液设置检测参数,调节检测电压和阴性区域。上机检测至少获取1 × 105 的阳性细胞做后续数据分析。 白色念球菌在正常的培养条件和含1 mM H2O2的培养液中培养,每隔15 min收集菌液,经0.5% 戊二醛固定,PI染色,流式