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利用体外合成带生物素标记的RNA富集细胞裂解液 中与之互作的蛋白的方法
A Method for Purifying RNA Interacting Proteins from Cell Lysates by Using in vitro Synthesized Biotin-labeled RNA
Authors:  朱林王会丽, 王栋 and date: 09/27/2022, view: 1858, Q&A: 0
RNA pull down实验首先将体外合成带有生物素标记的RNA与细胞裂解液进行孵育，接着用 链霉亲和素磁珠富集生物素标记的RNA，同时获得RNA-靶蛋白复合体。 体外转录RNA复性：取50 pmol体外转录得到的带有生物素标记的LINC00973 RNA (稀释至终体积约10-50 μl即可) 于 200 μl PCR管中，在65 °C水浴锅中加 热5 min， (见溶液配方)
细胞RNA Pulldown实验——利用体外合成带生物素标记的RNA检测细胞裂解液中与目标RNA互作的蛋白的方法
RNA Pulldown Assay
Authors:  桑凌杰瞿蕾, 陈怡君, 林爱福 and date: 09/15/2022, view: 2074, Q&A: 0
polymerase (T7 or Sp6，产生正义或者反义的RNA) 2 μl 注: 此处的正义或者反义的带标记的RNA，分别在2个EP管内制备，反义RNA将作为实验的负对照组。 RNA-蛋白孵育：5.1取预清洗好的包含有1mg蛋白的细胞裂解液各1 mg于两个新1.5 ml EP管中，加2 μl RNase Inhibitor，再分别加2 μg Biotin 标记的正义及反义对照 的Biotin标记 加样体系 1 μg of linearized p