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肠道固有淋巴样细胞亚群细胞因子分泌检测
Cytokine Secretion Analysis of Mouse Intestinal Innate lymphoid Cells (ILCs) by Flow Cytometry
Authors:  章晶晶沈蕾 and date: 11/20/2019, view: 8576, Q&A: 0
最后用200~300 μl FACS buffer重悬细胞，再使用70 μm滤膜过滤到流式管中，在流式细胞仪上检测相关细胞因子的分泌情况。结果与分析图4. 大肠固有淋巴样细胞分泌细胞因子的能力检测. 失败经验无法检测到细胞因子，最重要的原因可能是此次刺激实验无效，可能的原因有：1)刺激剂失效了，需要更换刺激剂，建议染色时加入一个阳性对照的细胞因子作为是否刺激成功的参照；2)细胞状态差，可通过细胞活力以及目的细胞群的细胞数判断此次样本状态好坏 小肠固有淋巴样细胞分泌
肠道固有层单核吞噬细胞和细胞因子分泌的流式检测
Flow Cytometry of Intestinal Mononuclear Phagocytic Subsets and Functions
Authors:  温珍亮苏小惠, 陈德昌, 张李迪, 牛泓深, 沈蕾 and date: 11/20/2019, view: 12285, Q&A: 3
在这套流式方案里，我们还加入了细胞因子 (IL-10，TNF-α) 以检测巨噬细胞细胞因子分泌情况。 上机流式检测及数据分析样本由BD LSRFortessa流式细胞仪检测。每个样本收集总Events数量为300,000个。采用FlowJo 10.5.3软件分析，设门方法见图5。 5% CO2培养箱中37 °C培养4小时，阻断细胞因子分泌到细胞外。 最后分别从IMs和RMs细胞中检测IL-10及TNF-α的表达。 设门结束后记录各细胞群的细胞比例及Cou
胞内染色法检测T细胞活化产生的细胞因子
Analyzing Cytokines Production during T Cell Activation by Flow Cytometry Intracellular Staining
Authors:  韩萍杨选明 and date: 11/20/2019, view: 7767, Q&A: 2
Buffer，按照200 μl/sample加入1× Permeabilization Buffer，用移液器吹打重悬细胞，室温15 min，破膜完成后，500 x g，离心3 min，去上清；胞内细胞因子染色 及TNF-α等也可以用同样的胞内染色方法进行流式检测。 结果与分析胞内染色法检测T细胞活化引起的IFN-γ的表达情况 结果分析：图1A通过FSC-A和SSC-A分析排除死细胞和细胞碎片，确定和收集主要细胞群；图1B进一步通过APC-A700-A染色确定CD8 μl/sample，500 x g离心3 min，弃去上清；用FACS b