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胞内染色法检测T细胞活化产生的细胞因子
Analyzing Cytokines Production during T Cell Activation by Flow Cytometry Intracellular Staining
Authors:  韩萍杨选明 and date: 11/20/2019, view: 7769, Q&A: 2
及TNF-α等也可以用同样的胞内染色方法进行流式检测。 结果与分析胞内染色法检测T细胞活化引起的IFN-γ的表达情况 结果分析：图1A通过FSC-A和SSC-A分析排除死细胞和细胞碎片，确定和收集主要细胞群；图1B进一步通过APC-A700-A染色确定CD8 本实验中也可以收集24 h时细胞上清，利用ELISA或CBA的方法检测上清中分泌IFN-γ的表达，胞内染色的优点在于能够明确产生IFN-γ的细胞类型，此外，其他
自然杀伤细胞毒性测定
NK Cell Cytotoxicity Assay
Author:  冯瑾date: 11/20/2019, view: 9430, Q&A: 0
... 由于IFN-γ在胞内内质网合成、高尔基体加工后向外分泌，这将影响IFN-γ胞内染色检测的准确性，所以在共孵育1小时后需加入Brefeldin A和Monensin封闭高尔基体。 NK细胞不同于T、B细胞，不表达TCR、BCR，但其胞质内富含嗜天青颗粒，激活后颗粒明显增多，这些颗粒与其杀伤活性有关，所以NK细胞的IFN-γ和其颗粒分泌能力的强弱可以间接反映出NK细胞杀伤功能的强弱 流式检测NK细胞胞内IFNγ和CD107a的水平
B细胞分化相关转录因子的流式检测
The Detection of B Cell Differentiation-related Transcription Factors by Flow Cytometry
Authors:  刘懿蕃华兆琳, 侯百东 and date: 11/20/2019, view: 4773, Q&A: 0
... (863 x g，1分钟，4 °C)，除去上清液，轻轻拍打板两侧使细胞颗粒松动；再次重复清洗步骤；向细胞中加入200 μl的FACS缓冲液，并将所有细胞转移到冰上的流式上机管中；需胞内染色的样品，在表面染色完成后 对细胞进行固定破膜；4 °C，863 x g，离心1分钟，弃去固定液；加入 200 μl BD 1x Cytoperm/Wash缓冲液，4 °C，863 x g，离心 1 分钟，弃去固定液，重复洗 2 遍；配制染胞内的抗体混合液 流式染色配置方案按照以
细胞增殖的流式检测（BrdU法）
BrdU Assay for Cell Proliferation Analysis by Flow Cytometry
Authors:  丁宇波王雪冬, 边玮 and date: 11/20/2019, view: 12957, Q&A: 0
... 注：固定及通透步骤对于胞内染色至关重要，为确保工作溶液的稳定和实验的重复性，推荐实验前新鲜配制，并于4 °C避光保存。 3.3清洗，加入1 ml染色缓冲液，4 °C，300 × g离心5分钟，弃上清。可选：该步骤固定清洗后的细胞，可于4 °C避光保存，72小时内继续后面的染色过程即可。 实验前，于冰上解冻，每31 μl加入1 ml 1× PBS稀释成1 mM工作液备用10% PFA储液 1)预先加热80 ml去离子水，烧杯放于通风橱内的磁力搅拌器上，确认水温低于
B细胞抗体类别的流式检测
The Detection of B Cell Antibody Isotype by Flow cytometry
Authors:  刘懿蕃华兆琳, 侯百东 and date: 11/20/2019, view: 8095, Q&A: 0
... ，除去上清液，轻轻拍打板两侧使细胞颗粒松动；再次重复清洗步骤;向细胞中加入200 μl的FACS缓冲液，并将所有细胞转移到冰上的流式上机管中;需胞内染色的样品，在表面染色完成后，加入100 μl BD ；4 °C，863 x g，离心 1 分钟，弃去固定液；加入 200 μl BD 1 x Cytoperm/Wash缓冲液，4 °C，863 x g，离心 1 分钟，弃去固定液，重复洗 2 遍；配制染胞内的抗体混合液 流式染色配置方案按照以上染色