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酵母流式细胞荧光分选流程
Fluorescence Activated Cell Sorting of Yeast Cells Using Flow Cytometry
Authors:  李婷婷李典范 and date: 11/20/2019, view: 10233, Q&A: 0
... 而HA标签C端则融合一个长铰链区连接到酵母细胞表面实现有效的展示(McMahon等,2018)。 结果与分析酵母表面展示库的诱导表达检测 在进行纳米抗体筛选之前,首先要确定的是纳米抗体在酵母细胞中的表达。图2展示的是一个典型的纳米抗体表达检测的结果。 1.2酵母表面展示库诱导:取细胞培养液,用单蒸水稀释10倍,加入340 μl稀释液到96孔板中,在酶标仪中测定细胞的OD600值。 流式检测酵母细胞表面展示蛋白的表达. 利用抗原
菌酶一体化重组酵母工程菌的设计与构建
Design and Construction of Recombinant Yeast with Surface-displayed Enzymes
Authors:  王谦王佳堃, 高德英 and date: 02/25/2021, view: 3149, Q&A: 0
... 免疫荧光分析木聚糖酶ORF6-UN表面展示Scale bar = 10 μm. A, C. 表面展示细胞EBY100/orf6-un; B, D. 四、 支架蛋白的表面展示支架蛋白的表达 挑取单菌落于5 ml YNB-CAA液体培养基,30 °C培养12~24
基于流式技术的哺乳动物细胞抗体进化平台的构建
Establishment of Mammalian Cell Platforms for Antibody Evolution Based on Flow Cytometry
Authors:  安莉莉陈川, 罗蕊琪, 赵云, 杭海英 and date: 11/20/2019, view: 5206, Q&A: 0
... 作为一个例子,我们用抗TNFα抗体基因替换了puroR,获得了在细胞膜表面稳定高水平展示抗TNFα 抗体的CHO细胞株,用于抗TNFα抗体的进化 (见注意事项2)。 使用胰酶消化细胞时需要注意,有些细胞表面展示的抗体对胰酶敏感,故需做预实验确定胰酶消化的最佳条件。对于那些对胰酶特别敏感的抗体,我们推荐用0.02% EDTA,37 °C,5分钟消化CHO细胞。 图2显示突变抗体结合GFP-TNFα的能力高于野生型抗体,即这些突变抗体展示细胞的“抗原结合/抗体展示”比例大于野生型抗体