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基于高内涵成像系统的斑马鱼血流动态分析
Dynamic Analysis of Zebrafish Blood Flow by High-content Imaging System
Authors:  任灿陈雪纯, 吴慧敏, 赵璐, 王毅 and date: 09/05/2021, view: 3441, Q&A: 1
而使用内涵成像系统,可自动进行拍摄,并通过其配套软件完成血流定量分析,具有操作简便、通量大、及活体动态观测等优势,可应用于抗血栓药物及相关药物的大规模高通量体内筛选。 拍摄血流动态视频:使用内涵成像系统进行逐孔自动拍摄(图1-2)。首先在2倍镜或4倍镜下定位胚胎并进行初步手动对焦,也可使用内涵成像平台自带软件MetaXpress编程进行自动对焦。 因此本文以苯肼血栓疾病造模为例,介绍内涵成像在斑马鱼活体胚胎进行血流动态分析相关
利用高内涵检测线粒体活性氧实验
Mitochondrial ROS (Reactive Oxygen Species) Assay
Authors:  李义赵宏伟, 韩帅, 裴钢 and date: 11/12/2021, view: 3421, Q&A: 0
图像定量分析方法 为定量分析Rotenone对线粒体活性氧水平的影响,我们使用Operetta内涵成像分析系统的配套软件Harmony进行图像分析,分析方法如图2。 内涵拍照:MitoSOX (510/580);Hoechst (350/461)。 将孔内培养液吸走,缓慢加入染色液50 μl,37度孵育10 min,然后用PBS清洗两遍 (注意缓慢,不要把细胞洗掉),最后加入100 μl HBSS,进行内涵成像检测。 利用Harmony定量分析
高内涵检测体系优化方法
The Optimization of High Content Imaging Detection System
Authors:  赵宏伟陈铭 and date: 06/01/2021, view: 3480, Q&A: 0
内涵荧光成像通常是灰度成像,图像的灰度值与细胞的荧光强度正相关,所以内涵图像可以用于图像的定量分析,因此在进行内涵成像时需要确认图像灰度的线性范围,防止过度曝光,确保定量的准确性 (通常利用对照进行预扫后进入分析界面预分析以确定适合分析的最佳曝光条件 实验步骤一、 内涵成像样品的准备 内涵成像样品的准备包含两个阶段,内涵筛选实验的设计阶段和筛选实验的操
线粒体质量定量分析
Quantitative Analysis of Mitochondrial Mass
Authors:  张文馨王瑛 and date: 11/25/2021, view: 3566, Q&A: 0
导出后线粒体总荧光强度内涵统计数据分析: 以B2,C2,D2孔为例:表1. 致谢感谢国家蛋白质中心复合激光显微镜系统提供内涵细胞分析仪的设备及技术人员的辅助。 五、数据分析 采用HCS
全基因组siRNA法筛选环形RNA的反式调控因子
Genome-wide siRNA Screen for trans-factors of Circular RNA Regulation
Authors:  李响陈玲玲 and date: 06/01/2021, view: 2873, Q&A: 0
... 使用Operetta内涵成像分析仪对清洗后的384板成像 (10倍长工作距离物镜,GFP和mCherry双通道) (图3)。 Operetta (PerkinElmer,Operetta内涵细胞分析系统)自动化洗板机ELx405 (BioTek,ELx405 Select Deep Well Microplate Washer Addgene, 产品目录号: #12260)pMD2.G (Addgene, 产品目录号: #12259)84消毒液Phosphate buffered saline (PBS) 缓冲
高通量siRNA文库筛选体系的建立及优化
High-Throughput siRNA Library Screening Assay Development and Optimization
Author:  韩帅date: 10/22/2021, view: 4006, Q&A: 0
... 建立内涵筛选体系时需要考虑的重要因素可参考本手册中《内涵检测体系优化方法》一文及《内涵成像及定量分析实验手册》。 例如,基于内涵成像的筛选体系,如果要用到高倍物镜或数值孔径较高的物镜进行拍摄,需用薄底板,且为了能够拍摄到靠近多孔板边缘的孔,对多孔板的裙边高度也有要求 (具体请参 考本实验手册《内涵检测体系优化方法 基于读值的筛选速度快、通量,但得到的信息相对较少
全基因组siRNA法筛选长非编码RNA NEAT1的转录调控因子
Genome-wide siRNA Screen for Transcription Regulators of Long Noncoding RNA NEAT1
Authors:  王洋陈玲玲 and date: 07/07/2021, view: 2180, Q&A: 0
... 使用Operetta内涵成像分析仪对清洗后的384板成像 (10倍长工作距离物镜,GFP和mCherry双通道)。 Operetta (PerkinElmer,Operetta内涵细胞分析系统)自动化洗板机ELx405 (BioTek,ELx405 Select Deep Well Microplate Washer #12260)pMD2.G (Addgene, catalog number: #12259)84消毒液Phosphate buffered saline (PBS) 缓冲液 (见溶液配方)仪器
原代海马神经元培养与高内涵筛选模型制备
Authors:  彭颖姜畅, 李卓轩, 王任远, 陈子贤, 林浩东 and date: 02/23/2022, view: 5130, Q&A: 0
图1.原代海马神经元提取和内涵药筛流程图 材料与试剂15 mL离心管 (Corning,catalog number: 430790) 50 mL离心管 (Corning,catalog number 自动分液器对原代海马神经元在96孔板中培养的条件进行了探究,并培养了分布均匀、形态良好和纯度较高的海马神经元 (图9和11),表明了机器的剪切力对神经元生存并无太大影响,且使用Operetta高通量细胞成像分析系统对原代神经元内涵药筛进行了初步探究 20min,再使用PBS洗涤3次,最后一次将PBS留在孔内;使用Oper