果蝇基因组DNA制备
Drosophila Genomic DNA Preparation
Authors: 邓娟 刘南 and
date: 06/20/2019,
view: 5389,
Q&A: 0
如溶液未变澄清,说明细胞裂解不彻底,应适当延长水浴时间,否则将可能降低DNA的得率或导致提取的DNA不纯。 2) 过度干燥将导致DNA重新溶解困难,肉眼可见DNA沉淀变成半透明状,离心管无明显乙醇味道即可,避免使用真空干燥器进行干燥。 得到的DNA用100~200 μl TE Buffer溶解。 提取的DNA可立即进行下一步实验或-20 °C保存。
注:25只果蝇成虫个体能得到约200 μg的DNA。溶液配方TE buffer (pH 8.0)
10 mM Tris-H
Preparation of Taq DNA Polymerase
Taq DNA聚合酶的制备
Author: Wei Zhengdate: 10/05/2011,
view: 34746,
Q&A: 1
加入25ml裂解缓冲液,混匀,转移制备到Pyrex烧瓶,并在75°C孵育1小时。将制备物分成两个Oakridge管,在4℃下以15,000rpm离心10分钟。 倾析上清液,并将制备物重悬在50ml缓冲液A中。在4℃下在4.5K离心10分钟,倾析上清液,并将制备物重新悬浮在25ml预裂解缓冲液中。在室温(RT)孵育15分钟。 滗析上清液,重悬于10ml缓冲液A中制备第3天& 4将重悬的蛋白质在4℃下对储存缓冲液的3次变化进行透析。 在2L烧瓶中制备500ml含40mg氨苄青霉素的L