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果蝇肠道上皮干细胞克隆的诱导和大小分析
Induction and Analysis of Intestinal Stem Cell Clones in the Drosophila Midgut
Authors:  殷畅袭荣文 and date: 06/20/2019, view: 7047, Q&A: 0
... 背景介绍FRT/FLP系统: 依赖于酵母中位点特异的重组酶flippase (Flp) 和它的识别靶向序列 (FRT)，我们可以在果蝇肠道上皮中实现具有时空限制的转基因表达 (del Valle 这一技术称为Flp-out，其主要原理是通过热激 (heat shock) 或其他手段诱导Flp的表达，使其识别FRT位点并通过两个FRT位点的翻转去除导致基因沉默的转录终止信号，从而实现在单一细胞中诱导特定基因的激活
果蝇肠上皮干细胞谱系示踪
Lineage Tracing in Drosophila Intestinal Stem Cells
Authors:  郭兴庭袭荣文 and date: 06/20/2019, view: 6098, Q&A: 0
... 特定细胞中表达的Gal4驱动转座酶 (Flippase, Flp) 的表达,进而诱导终止子两端FRT序列进行同源重组，除去终止子，启动lacZ报告基因表达，标记相应细胞及其子代细胞 (改变自Evans等 细胞谱系追踪系统. 谱系追踪系统非常敏感，18 °C培养时即使有低水平的Gal4活性也能诱导lineage标记产生，因此最好有多个Gal80元件，抑制其在发育时期的表达。 材料与试剂耗材1)1.5 ml离心管2)移液枪头果蝇品系1)Su(H)-Gal4 (from Steven Hou lab)2)u-Flp
实验用果蝇的饲养及管理
Guidance for Drosophila Culture and Management
Authors:  王霞 沈达 , 乔欢欢 , 孙锦 , 徐荣刚 , 刘清飞 , 倪建泉 and date: 06/20/2019, view: 20424, Q&A: 2
... 6)对于较难产生克隆的系统 (如利用FLP/FRT系统进行突变体克隆诱导，或针对卵巢生殖干细胞进行克隆诱导)，可每间隔8 h热激一次，多次热激可提高产生克隆的效率。 4.3利用FLP/FRT系统诱导嵌合体的方法： 1)将果蝇 (幼虫或成虫) 驱赶到果蝇管最底部 (幼虫可使用镊子逐一夹出放入新的果蝇管，成虫可轻磕果蝇管使其掉落)，然后将海绵塞下压，使食物顶部与海绵塞之间仅保留 4.2利用Gal4/UAS系统驱动目的基因RNAi或过表达时，有时为了