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胃癌细胞中Hippo通路负调控因子筛选-YAP出入核检测
Screening of Negative Regulators of Hippo Pathway in Gastric Cancer Cells with Nuclear Translocation of YAP as Readout
Authors:  汤扬焦石, 周兆才 and date: 06/01/2021, view: 3227, Q&A: 0
由于Hippo信号通路受细胞密度的影响，细胞密度低的情况下，Hippo信号通路被抑制，YAP入核；细胞密度高的情况下，YAP在细胞质中 (Zhao et al., 2007; Ota and Sasaki 因此，我们选择在低细胞密度的情况下进行筛选Hippo通路的负调控因子。测试条件： 细胞密度梯度：每孔250、500、750、1,000个细胞。 转染试剂：RNAiMAX和DharmaFECT1。 Inactivation of YAP oncopro
高通量siRNA文库筛选体系的建立及优化
High-Throughput siRNA Library Screening Assay Development and Optimization
Author:  韩帅date: 10/22/2021, view: 3944, Q&A: 0
... 在某些实验体系中，所关注的表型受细胞密度调控比较明 显，例如本手册《胃癌细胞中Hippo通路负调控因子筛选-YAP出入核检测》的案 例 (Tang et al., 2020) 中，Hippo通路中YAP 某些特定表型或信号转导通路只在某些特定的细胞类型中存在。在满足这个条件的前提下，贴壁牢的细胞相对而言更易操作；如果是基于成像的筛选体系，细胞铺展较开且非成团生长的细胞所获得的图像相对更易分析。 如果关注特定类型的死 亡通路，可对特定死亡通路的标