RNA原位杂交
RNA in-situ Hybridization
Authors: 程珂陈炯炯,
鄢文豪,
欧阳亦聃 and
date: 05/30/2018,
view: 17723,
Q&A: 4
2.4探针方向的确定:
用于原位杂交检测的探针是与体内mRNA互补的RNA,称为反义RNA;用于阴性对照的探针是与体内mRNA方向相同的,称为正义RNA。 用于原位杂交的载玻片必须保证无RNase,我们需要先用95%乙醇浸泡,然后再用干净的手帕擦干,用锡纸包裹后,180 °C烘6 h。如果载玻片本身很干净无浮尘,也可以直接180 °C烘6 h。 纯化在进口离心管中进行,试剂用RNA专用的。 如果cDNA在载体中的连接方向如图1所示时,用NcoⅠ酶切、SP6转录酶转录的探针是反义RNA