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RNA原位杂交
RNA in-situ Hybridization
Authors:  程珂陈炯炯, 鄢文豪, 欧阳亦聃 and date: 05/30/2018, view: 17723, Q&A: 4
2.4探针方向的确定: 用于原位杂交检测的探针是与体内mRNA互补的RNA,称为反义RNA;用于阴性对照的探针是与体内mRNA方向相同的,称为正义RNA。 用于原位杂交的载玻片必须保证无RNase,我们需要先用95%乙醇浸泡,然后再用干净的手帕擦干,用锡纸包裹后,180 °C烘6 h。如果载玻片本身很干净无浮尘,也可以直接180 °C烘6 h。 纯化在进口离心管中进行,试剂用RNA专用的。 如果cDNA在载体中的连接方向如图1所示时,用NcoⅠ酶切、SP6转录酶转录的探针是反义RNA
Detecting Spaciotemporal Transcript Accumulation in Maize by RNA In Situ Hybridization
用RNA原位杂交技术检测玉米转录本时空积累
Authors:  Josh StrableJames W. Satterlee and date: 02/20/2021, view: 3194, Q&A: 0
... 然而,RNA原位杂交不是用于基因表达的定量方法。RNA原位杂交的协议有许多步骤,可能需要花费数天的时间,从而使故障排除过程变得更加复杂。 ...
果蝇翅成虫盘RNA原位杂交技术
RNA in situ Hybridization in Drosophila Wing Imaginal Discs
Authors:  张延松刘敏, 朱健 and date: 06/20/2019, view: 4929, Q&A: 0
注意事项探针的质量 探针质量是决定原位杂交结果的关键环节。我们一般会通过DNA凝胶电泳对探针质量进行检测。探针应检测到一条轻微弥散的RNA带,过于弥散或者没有条带则代表探针合成质量差 (图2)。 结果与分析原位杂交结果示例 (图1):图1. 原位杂交实验结果. w1118基因型果蝇翅成虫盘使用wg反义荧光探针(A) 和wg正义荧光探针 (B) 的VectorRed红色荧光底物显色。 组织原位杂交 准备2.1在PBS缓冲液中解剖果蝇三龄幼虫,暴露翅成虫盘。具体流程请参照“果蝇翅成虫盘免疫荧光染色” (高远等