ImageJ测量WB条带灰度值

一、视频摘要

通过软件ImageJ测量western blot条带的灰度值，通过将内参均一化，来比较实验组与对照组相比蛋白浓度的变化，并通过prism将数据量化作图展示出来。

二、关键词

ImageJ，western blot，prism，灰度值

三、实验样品信息，试剂、耗材或仪器

1.样品信息

实验组和对照组的Western blot条带图（内参和目的蛋白）

2.试剂和耗材

无

3.仪器和软件

ImageJ，prism

四、实验操作

在ImageJ中通过File→Open分别打开内参和目的蛋白的western blot图，然后将胶图通过Image→Type→8-bit将图片转为8位的灰度图,用矩形选框工具（工具栏第一个）框选同一行的所有条带,按Ctrl+1，紧接着按Ctrl+3，得到峰形图,用直线工具，将所有小峰图封闭起来,选择魔法棒工具，依次点击封闭后的各个小峰，即可得到灰度值.然后将内参的灰度值均一化，去比较目的蛋白的灰度值，并用prism量化。

五、注意事项

Western blot的图片尽可能的条带清晰，背景较浅，这样测出来的灰度值会更准确。