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ImageJ测量WB条带灰度值

王琳 |  2022-11-23  | DOI: 10.21769/BioProtoc.v1029
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视频简介通过ImageJ测量western blot条带的灰度值,并通过prism进行柱状图的绘制
  • 视频介绍

一、视频摘要

通过软件ImageJ测量western blot条带的灰度值,通过将内参均一化,来比较实验组与对照组相比蛋白浓度的变化,并通过prism将数据量化作图展示出来。

二、关键词

ImageJ,western blot,prism,灰度值


三、实验样品信息,试剂、耗材或仪器

1.样品信息

实验组和对照组的Western blot条带图(内参和目的蛋白)


2.试剂和耗材


3.仪器和软件

ImageJ,prism


四、实验操作

在ImageJ中通过File→Open分别打开内参和目的蛋白的western blot图,然后将胶图通过Image→Type→8-bit将图片转为8位的灰度图,用矩形选框工具(工具栏第一个)框选同一行的所有条带,按Ctrl+1,紧接着按Ctrl+3,得到峰形图,用直线工具,将所有小峰图封闭起来,选择魔法棒工具,依次点击封闭后的各个小峰,即可得到灰度值.然后将内参的灰度值均一化,去比较目的蛋白的灰度值,并用prism量化。

五、注意事项

Western blot的图片尽可能的条带清晰,背景较浅,这样测出来的灰度值会更准确。

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