一、视频摘要
流式细胞术是一种对处在快速流动中的细胞或其它生物颗粒逐个进行多参数的快速定量分析和分选的技术。而FlowJo是用于分析流式细胞术检测结果的通用软件,操作简单,可以完成多种专项数据的分析,注入诸如细胞周期、细胞凋亡、免疫细胞分群、荧光强弱等。在此简要介绍了FlowJo在分析免疫细胞中的主要操作流程。
二、关键词
流式细胞术、FlowJo、免疫细胞
三、实验样品信息,试剂、耗材或仪器
1. 样品信息
视频中呈现的图片为小鼠乳腺组织中巨噬细胞和中性粒细胞的检测结果。
2. 仪器和软件
仪器:BD
Accuri c6
软件:FlowJo10
四、实验操作
1. 导出FCS文件,将FCS文件拖入FlowJo中(注意FCS文件保存于桌面或与FlowJo在同一子目录下),进行分组。
2. 根据空白对照,在FSC
SSC图中圈出免疫细胞群(提前查阅资料或预实验确定碎片、淋巴细胞、单核细胞等的大概位置,根据需要圈出细胞)。
3. 根据单标,确定该通道阳性细胞群的位置。以此类推。确定目标细胞群,
4. 在layout中作图。
五、注意事项
1. 注意调节补偿(单标对照)。
2. 根据实验需要,做空白对照,单标,减一对照。
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