一、视频摘要
培养的细胞由于细胞增殖，数量增加，细胞难以继续生长繁殖，需要进行分瓶培养，将培养的细胞分散，以1:2或1:3以上的比率转移到另外的容器中进行培养，即为传代培养，一般细胞可传代10-50代。
二、关键词
细胞、细胞增殖、传代培养
三、实验样品信息，试剂、耗材或仪器
1. 样品信息
支气管上皮细胞
2. 试剂和耗材
试剂：10%FBS培养基、胰酶、PBS、75%酒精
耗材：T25培养瓶、T75培养瓶、15ml离心管、1ml枪头
3. 仪器和软件
生物安全柜、培养箱、移液枪、离心机、水浴锅
四、实验操作
1.吸除T25培养瓶内旧的培养液，在T25培养瓶内打入1ml的PBS清洗并吸除；
2.
T25培养瓶中打入1ml的胰酶消化细胞，将T25培养瓶放入培养箱中消化1-2分钟；
3.取出T25培养瓶，显微镜下观察消化情况，在T25培养瓶中打入1ml的10%FBS培养基终止消化；
4.将细胞悬浮液转移至15ml离心管中，以900rpm的转速离心5分钟；
5.在离心间隙，准备两个新的T75培养瓶，标上细胞名称、代数、操作者姓名和日期，在T75培养瓶中先打入8ml的10%FBS培养液并铺匀；
6.离心机中取出离心管，管底可见细胞沉淀，吸除离心管中上清液，注意不要吸到细胞沉淀；
7.在离心管中加入2ml的10%FBS培养液，吹打混匀制成细胞悬浮液，将细胞悬浮液转移到T75培养瓶中并吹打混匀；
8.八字法或米字法使细胞均匀铺开；
五、注意事项
1.避免污染，吸取吹打PBS或者培养基的枪头都不可以混用或与废液缸直接接触；
2.注意胰酶消化时间和程度，消化太过会使细胞形态改变，消化不充分会使细胞滞留在培养瓶上；
3. 吸除离心管中上清液，注意不要吸到细胞沉淀；
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