HT22细胞传代培养

一、视频摘要

传代培养是组织培养常规保种方法之一，也是几乎所有细胞生物学实验的基础。当细胞在培养瓶中长满后就需要将其稀释分种成多瓶，细胞才能继续生长，这一过程就叫传代。传代培养可获得大量细胞供实验所需。传代要在严格的无菌条件下进行，每一步都需要认真仔细的无菌操作。

二、关键词

HT22细胞系，细胞传代，HT22细胞培养，小鼠海马神经细胞

三、实验样品信息，试剂、耗材或仪器

1. 样品信息

2. 试剂和耗材

10%DMEM，胰酶，PBS，15毫升离心管，T75培养瓶，细胞计数板

3. 仪器和软件

生物安全柜，CO₂培养箱，光学显微镜，细胞计数仪，离心机，水浴锅，Constar软件

四、实验操作

1. 吸除旧的培养液。

2. 加入消化液进行细胞消化。

3. 消化一定时间后，加入与消化液等体积的培养液终止消化。

4. 转移至离心管进行离心。

5. 吸除废液，加入培养液吹打细胞。

6. 进行细胞计数。

7. 转移细胞液至培养瓶，平铺均匀，放入二氧化碳培养箱。

五、注意事项

1.用移液枪吹打细胞时，不要吹出气泡，轻微吹打混匀，以免细胞死亡。

2.所有物品在拿进生物安全柜之前都需要喷洒酒精消毒。

3.传代培养时要注意无菌操作并防止细胞之间的交叉污染，所有操作要尽量靠近酒精灯火焰，每次最好只进行一种细胞的操作。每一种细胞使用一套器材，培养用液应严格分开。

4.每天观察细胞形态，掌握好细胞是否健康的标准：健康细胞的形态饱满，折光性好，生长致密时即可传代。