一、视频摘要
细胞冻存，是指将正常培养的细胞冻存在液氮或者-80℃冰箱中的一种长期保存细胞的方式，可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来，这样在需要的时候再复苏细胞用于实验。而且适度地保存一定量的细胞，可以防止因正在培养的细胞被污染或其他意外事件而使细胞丢种，起到了细胞保种的作用。
二、关键词（3-5 个关键词便于被搜索）
细胞冻存
细胞留种
三、实验样品信息，试剂、耗材或仪器
1. 样品信息
Hepa1-6细胞：C57/L小鼠中产生的BW7756小鼠肝癌细胞的衍生株，上皮样细胞 ，贴壁生长。
2. 试剂和耗材
1.DMEM高糖培养基 2.T25培养瓶 3.15ml离心管 4.5ml巴氏灭菌吸管 5.胎牛血清 6.双抗（青霉素-链霉素）7.冻存管8.冻存液
3. 仪器和软件
1.显微镜 2.CO2培养箱 3.无菌工作台 4.高速离心机5.超低温冰箱
四、实验操作
1.将实验耗材放入无菌工作台内紫外照射30min。
2.配置冻存液，将血清和冻存液以9：1的比例配置成冻存液放于4℃冰箱保存。
3.从培养箱中取出细胞，用吸管吸出培养瓶中培养基，注入3-5ml胰酶消化细胞。
4.约3分钟后镜下观察，发现细胞成片脱落表明消化成功，并加入5ml完全培养基终止消化。
5.用细胞悬液吹打培养瓶壁，使细胞完全脱落，并将细胞悬液转移至15ml离心管中。
6.离心管放入离心机，配平后，12000rpm，5min
7.弃去上清液，加入1.5ml冻存液重悬细胞，转移置冻存管中并缠好封口胶。
8.将冻存管放于4℃冰箱0.5h，然后转移至－20℃冰箱2h，最后转置－80摄氏度冰箱过夜，可在－80℃保存，也可以转至液氮罐长期保存。
五、注意事项
1.无菌操作
2.加入冻存液后要立即转入4℃冰箱避免冻存液的毒性作用影响细胞活性。
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