一、视频摘要
本实验展示了从6孔板中收取细胞后，使用Trizol法提取细胞RNA的详细步骤，并对实验中可能遇到的问题进行了一些拓展，最后使用Bioteck仪器配合GENE5软件检测样品浓度和质量。
二、关键词
Trizol法，细胞，RNA提取，浓度检测
三、实验样品信息，试剂、耗材或仪器
1. 样品信息
细胞
2. 试剂和耗材
试剂：Trizol，DEPC水，氯仿，异丙醇，75%乙醇
耗材：RNAase-free的移液器枪头、EP管
3. 仪器和软件
仪器：离心机，涡旋仪，-80℃冰箱，bioteck-plate
软件：GENE5
四、实验操作
1、吸弃细胞培养基，使用PBS清洗，加入1
ml Trizol后，静置5min，使细胞充分裂解，之后将裂解液吸到RNAase-free的EP管中；
2、加入氯仿200
ul，剧烈振荡20s，可以观察到液体浑浊，静置3min后，离心，4℃，12000rpm，15min；
3、吸取上清大概400
ul至新的RNAase-free的EP管中，加入等体积异丙醇，混匀后放入-80℃，30min；
4、使用离心机离心，4℃，12000rpm，10min；
5、弃上清，加入1
ml预冷的75%乙醇，充分颠倒，离心，4℃，12000rpm，10min；
6、尽可能吸尽上清，晾干，之后加入30
ul DEPC水溶解。如果RNA较多，可以68℃金属浴促溶；
7、使用GENE5测浓度。
五、注意事项
1、全程佩戴口罩；
2、所用试剂和耗材应保证RNAase-free。
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