一、视频摘要
细胞转染是指将外源分子（如DNA，RNA等）在脂质体等介导下进入真核细胞的实验技术之一。随着分子生物学和细胞生物学研究的不断发展，转染已经成为研究和控制真核细胞基因功能的常规工具。细胞转染可分为瞬时转染和稳定转染，瞬时转染指外源DNA/RNA不整合到宿主染色体中,通常只持续几天，在转染后24-72小时内分析结果，多用于启动子和其他调控元件的分析。本视频主要介绍的就是瞬时转染。而我们常用的细胞转染方法有电穿孔法、显微注射、脂质体转染，磷酸钙共沉淀法、原生质体转染、病毒介导的转染。而脂质体转染是最常规的，现在也是转染的最佳选择之一。本视频根据lipo3000说明书，提供了脂质体转染过程以及其中的注意事项。
二、关键词（3-5 个关键词便于被搜索）
细胞转染，lipo3000，脂质体转染
三、实验样品信息，试剂、耗材或仪器（如果视频中没有包含关键实验试剂、耗材或仪器信息，建议对关键的实验
试剂、耗材或仪器的品牌, 产品目录号或型号等用文字或图片加以说明。）
1. 样品信息
HELA细胞
2. 试剂和耗材
Lipo3000（invitrogen）
P3000（invitrogen）
ShRNA（genepharma）
ShNC（genepharma）
Opti-MEM（gibco）
DMEM培养基
3. 仪器和软件
超净台、细胞孵箱
四、实验操作
12孔板
A:opti-MEM
125ul+lipo3000 5ul+shRNA 5ul
B：opti-MEM
125ul +P3000 5ul
混合孵育15min，加入细胞中，细胞中含有无双抗培养基750ul；
10cm皿：
A:opti-MEM
500ul+lipo3000 32.55ul+shRNA 55ul
B：opti-MEM
500ul +P3000 32.55ul
混合孵育15min，加入细胞中，细胞中含有无双抗培养基900ul；
五、注意事项
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转染前细胞必须处于良好的生长状态，不建议为了赶实验周期而在细胞生长状态不稳定或较差的时候强行转染。
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建议做好转染预实验，摸索最合适于细胞的转染手段及转染体系，尤其原代细胞、悬浮细胞、淋巴细胞等，不建议所有细胞一个转染操作标准；同时设置工具细胞（293T）转染对照组。（具体情况具体分析，不要想着一招鲜吃遍天哦！）
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质粒浓度：细胞转染的质粒浓度不低于500ng/ul，病毒包装的质粒浓度不低于0.8ug/ul；
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不要使用冻结的或储存温度低于4℃的脂质体试剂
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细胞70-90%融合率进行转染
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点滴法将脂质体加入细胞中，避免浓度分布不均
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