一、视频摘要
实验原理：细胞在培养瓶长成致密单层后，已基本上饱和，为使细胞能继续生长，同时也将细胞数量扩大，须进行传代再培养。传代培养也是一种将细胞种储存下去的方法。同时也是利用培养细胞进行各类实验的必通过程。
目的：进行传代之后能为后续实验提供大量所需细胞。
结果：肝细胞每次传代成功，都为后续实验提供更多细胞，能开展更多实验。
二、关键词
肝细胞、离心、传代
三、实验样品信息，试剂、耗材或仪器
1.样品信息
BRL-3A肝细胞
2.试剂和耗材
1X
PBS缓冲液（细胞培养）
胰酶
DMEM培养基
3.仪器和软件
离心机
二氧化碳培养箱
四、实验操作
将肝细胞用胰酶消化下来后进行离心，先在T25中加入新的4mL培养基，再加入新的1mL培养基于离心管中混悬，吹打混匀，将离心管细胞液打入T25中，多次吹打，平铺T25，使细胞加入时均匀铺于T25一面。标记好细胞名、时间、代数、自己姓名后将T25放入二氧化碳培养箱。
五、注意事项
1)传代培养时要注意无菌操作，
所有操作要尽量靠近酒精灯火焰，
手不能在瓶口上方操作，以免污染气体进入瓶内。要防止细胞之间的交叉污染，
每次最好只进行一种细胞的操作，每一种细胞使用一套器材。每种试剂使用一个移液管，培养用液要严格分开。
2)坚持每天观察细胞，生长致密时即可传代。如发现有污染迹象，应丢弃污染的细胞。
3)细胞消化时要注意观察，不要消化过度，否则细胞不宜存活。吹打细胞时，确保瓶壁所有地方均吹打到，吹打时动作要轻柔，不要用力过大，以防细胞破碎。
4)培养箱不要反复多次开关，以免影响温度的稳定和增加污染的机率。
声明：该视频作品仅代表作者观点，用于共享科学技术。内容仅供大家参考，不代表本站立场。