视频简介当培养的细胞增殖达到一定密度后，将会出现密度抑制现象，表现为细胞的生长和分裂速度逐渐减慢，甚至停止。贴壁细胞会在培养瓶中长成致密单层 ，铺满培养瓶底部，此时如果不及时进行分装再培养，即传代培养，细胞将逐渐走向衰老、死亡，将培养的细胞从一个容器以适当比率转移到其他容器中扩大培养，称为传代培养。实验步骤1. 从CO2培养箱中取出长满的3T3细胞，密度达到90%可以传代2. 将细胞培养液吸去，沿瓶身侧面加入少量PBS，轻晃瓶身使PBS充分接触细胞，冲洗后将PBS移去，重复两次。3. 加入1ml胰蛋白酶，37℃消化2分钟，用显微镜观察到细胞离散成单个圆形、细胞间出现间隙、呈沙状移动，悬浮在培养液中即可。4. 加入4mL培养基终止消化，反复吹打细胞，使其充分悬浮并吸取到离心管中。5. 将细胞在2000rpm下离心5分钟。6. 将离心后细胞上清培养基吸去，轻轻吹打细胞沉淀，使其散开，加10mL培养基充分混匀 。7. 将10ml细胞悬液分别加入到2个T25培养瓶，每瓶5ml，轻轻前后摇匀，标注名称、日期。8. 将培养瓶放置显微镜下观察是否摇匀，无误后放入培养箱37℃、5% CO2、90%湿度下培养。