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western blot 电泳

陈津子, 吴淑婷龙舒婷 |  2020-12-29
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视频简介 western blot 是定性、定量检测蛋白表达。采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测的是蛋白质,可以对蛋白质样品进行分离,下一步实验就是转移至固相载体(例如 pvdf膜)。
实验样品信息:
试剂:电泳缓冲液、蛋白和5×loading buffer、marker (15-120kd)
仪器:电泳仪Ecp3000三恒电泳仪、转印电泳仪
实验流程:倒一部分电泳液——放槽体——倒完全部电泳液——拔梳子——加样——电泳工作
实验注意操作:
槽体缓慢倾斜放入,可以避免消除槽体底部缝隙的气泡,注意电极方向;拔梳子时要垂直拔出,如果孔内有小气泡用移液器吹出;内槽液要没过凹版,不然跑胶蛋白不同位置的跑胶速度不一致;跑胶时,要注意目的条带在哪里,蓝色长条带跑出即可停止;