一、视频摘要
胶原是神经元细胞外基质的主要成分（90%），胶原蛋白在轴突以及突触连接和维持中具有重要作用，1mg/ml I型胶原基质的形成主要是因为溶解胶原的酸和配方中的碱中和，在其上培养细胞可以使体外实验更接近体内脑组织的微环境，使研究结果更有体内应用价值，且其无毒，有利于应用于临床。
二、关键词
胶原；基质；硬度
三、实验样品信息，试剂、耗材或仪器
1. 样品信息
1mg/ml I型胶原基质
2. 试剂和耗材
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PBS
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Monad
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I型胶原
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Advanced BioMatrix
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DMEM培养基
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Gibco
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血清
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Cell Sera
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双抗
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Gibco
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24孔板
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Corning
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3. 仪器和软件
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生物安全柜
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中海净化
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37℃细胞培养箱
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Thermo Scientific
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四、实验操作
1. 在生物安全柜内，尽量保持试剂低温，将500ul的0.1mol·L PBS，然后依次加入25µl的4％NaOH、1550µl的H2O、840µl的0.01mol·L PBS、1250µl的I型胶原、835µl HFM培养基（89%DMEM培养基、10%血清、1%双抗）分别加入到10ml 离心管中；
2. 彻底混合溶液，避免产生气泡； 24孔板每孔加入200 μl混合液（其他体积孔板按体积比例增减），将孔板旋转一周使混合物均匀铺于孔板底部；
3. 置于37°C细胞培养箱孵育30分钟以上成胶。
五、注意事项
1. 制备需要的每一个成分都需要全部溶解且提前混合均匀
2. 制备过程中保持混合物的低温，防止提前凝固，尽快制备否则需冰上操作
3. 制备过程中防止产生气泡
4. I型胶原有黏性，需要尽量全部加入进混合物中
5. 混合物加入孔板中后，不能剧烈晃动，只需旋转一周，确保混合物均匀铺于孔板底部即可
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