用于建库的组织样品 (浸泡于RNA稳定和储存溶液中),从冰箱取出,于冰上融化,将组织取出并用吸水纸吸干表面液体。使用RNA提取试剂盒 (FastPure Cell/Tissue Total RNA Isolation Kit,Vazyme公司,RC101) 提取组织总RNA (提取过程注意防范RNase污染):
用于测序的总RNA样品,从冰箱取出,于冰上融化。使用RNA建库试剂盒 (VAHTS Universal V6 RNA-seq Library Prep Kit for Illumina,Vazyme公司,NR604)、rRNA去除试剂盒 (Ribo-off ® rRNA Depletion Kit (Human/Mouse/Rat),Vazyme公司,N406)、rRNA去除试剂盒 (Ribo-off ® rRNA Depletion Kit (Bacteria),Vazyme公司,N407)、高通量测序接头试剂盒 (VAHTS RNA Multiplex Oligos Set1- Set2 for Illumina,Vazyme公司,N323/N324) 进行建库实验 (Shi et al., 2016; Zhang et al., 2018):