犬体细胞克隆
Canine Somatic Cell Nuclear Transfer
Authors: 王晓民赖良学 and
date: 12/20/2022,
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结果与分析重构胚胎的融合率低，可能与卵母细胞的成熟程度或是融合的条件和参数有关；体细胞克隆效率低，可能与体细胞的类型和整个克隆操作效率有关。 失败经验细胞融合过程中需要将胚胎摆好，让体细胞的位置与电流方向垂直；细胞电融合过程中可以适当提高电压或是换用点状电极。 min；染色完成后清洗胚胎，并将胚胎转移到胚胎操作液中；在倒置显微镜下用固定针固定好卵母细胞，将极体置于3点钟方向；在荧光照射下可以看到细胞核，并用注射针吸去细胞核，第一极体及周边的胞质；用注射针吸取体细胞 ，并将体细胞注射到去核的卵母细胞卵周隙中
猪体细胞核移植
Porcine Somatic Nuclear Transfer
Authors: 樊娜娜欧阳振,
王教伟,
赵宇,
赖良学 and
date: 11/20/2022,
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供体细胞的处理
处于G0期（静止期）和G2/M期的体细胞均可作为核移植供体细胞。G0期细胞的获得（血清饥饿法）：
解冻细胞，铺于24孔板或4孔板中培养。 供核细胞核转移
将供体核移入受体卵母细胞胞质有两种方法：一是直接将供体细胞核注射到去核卵母细胞胞质中的直接注射法；二是将供体细胞注到卵母细胞的透明带下，通过电脉冲将供体细胞与去核卵母细胞融合获得重构胚的融合法 融合法
去核操作滴中，每个卵母细胞去核完成后，吐出吸取的卵母细胞核和极体；用去核针吸取一个供体细胞，从去核时
小鼠体细胞核移植
Mouse Somatic Cell Nuclear Transfer
Authors: 丁一夫陈国元,
唐蔚,
吴宝金 and
date: 09/20/2022,
view: 2784,
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三、 供体细胞的准备核移植所用的供体细胞有很多，应当根据不同的细胞选择不同细胞准备方式，下面以卵丘细胞为例。 胚胎状态是由很多因素共同决定的，如果排除培养基的问题以及培养箱温湿度、二氧化碳浓度等硬件上的问题，可能与供体细胞的状态和注射的操作有关，克隆胚胎发育率低于正常的受精胚胎，因此对操作的要求更为严格。 五、 卵母细胞体细胞核移植使用微量上样器从注射针的尾部向针内加入约2-3 mm高的汞（有的系统中，使用无毒性的重油替代有毒的汞），将注射针安装上显微操作仪（上一步实验时的持卵针若已经拆除，此时还需要同时安装上持卵针 （完
猴体细胞核移植
Somatic Cell Nuclear Transfer of Monkeys
Authors: 王燕许玉婷,
李春杨,
孙强 and
date: 03/20/2023,
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三、成纤维供体细胞准备从液氮中取1管成纤维细胞，在37 °C水浴中快速解冻。立即将细胞转移到15 ml 的离心管中。加入3-5 ml 细胞培养基，轻轻吹打混匀。 在一个操作液滴加适量2.5 mol/L融合病毒包膜(HVJ-E)，将供体细胞滴加到这个操作滴中。将去核的卵母细胞移入其他操作滴中，用激光破膜仪在透明带打出一个通道。 用注射针管吸取病毒液滴的供体细胞通过该通道注射进入卵母细胞（图1. d，e），之后在 37 °C、5% CO2条件下将操作的卵母细胞移入预平衡的HECM-9培养皿中。 四、体细胞核移植在实验前使用P9
Colony PCR Using Yeast Spheroplasted Cells
酵母球状体细胞的菌落PCR
Author: Bio-protocol Editordate: 01/05/2011,
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该方案的第一部分涉及使用酵母裂解酶去除酵母细胞壁。 然后可将所得的原生质球细胞用作PCR的模板。 这个快速和容易实施协议描述如何准备原生质球酵母细胞殖民地PCR。 材料和试剂原生质球酵母细胞Zymolase 20 T [AMS Biotechnology（Europe）]山梨醇磷酸钠酵素溶液（见配方）设备无菌移液器吸头标准实验室PCR机木牙签程序用无菌移液器吸头从平均体积的酵母菌落（0.5-2 mm）或液体培养基中取出细胞沉淀。注意：完整的细胞，在4℃下储存长达3个月的平板上的菌落或液体培养物仍然可以用于该方法。 应避免使用木制牙签，因为它们可能会干扰酵母细胞中的DNA释放或PCR反应本身。