小鼠囊胚注射
Mouse Blastocyst Injection
Authors: 唐蔚俞骞,
陈子尘,
李周结,
王倩雯,
丁一夫,
吴宝金 and
date: 09/20/2022,
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用固定针吸住囊胚,调整好囊胚的位置,使囊胚内细胞团处于合适的位置(一般为9点钟方向),在3点钟方向挑选滋胚层细胞连接处薄弱处作为入针点,点踩压力破膜仪踏板,用脉冲打破透明带,将注射针轻轻插入囊胚腔体,将 用口吸管吸取10-15枚适度扩展的囊胚,放入ESno2inolif液滴中,然后吸取适量ES细胞,缓缓吹入液滴中,使其沉淀到底部。 由于自然交配囊胚产量不高,而且胚胎发育可能不同步,通常选择3-4周龄的雌鼠进行超排以便获得足够数量的受精卵。可育雄鼠:选用8周龄以上的同品系雄鼠,最好有过交配
小鼠胚胎移植
Embryo Transfer in the Mouse
Authors: 唐蔚李周结,
俞骞,
陈子尘,
王倩雯,
陈国元,
吴宝金 and
date: 09/20/2022,
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... 子宫移植使用的毛细玻璃管,每根移植管的内径都应大于一个囊胚的直径而小于2个囊胚的直径。制作步骤如下:打开酒精灯,双手捏住毛细玻璃管的两头。置于外焰煅烧数秒后,离开火焰的同时水平拉长毛细管。 小鼠胚胎输卵管移植 四、 子宫移植:子宫移植用于囊胚期胚胎的移植。 在子宫输卵管结合部下方避开血管用注射器针头在子宫壁上刺一个斜角向上的小孔至子宫腔,将移卵管从小孔处插入子宫腔内2—3 mm,将囊胚吹进子宫,略停片刻再拔出。 囊胚期胚胎的吸取:从CO2恒温培养箱中取出装有胚胎的KSOM培养皿,将胚胎转移到FHM