小鼠体细胞核移植
Mouse Somatic Cell Nuclear Transfer
Authors: 丁一夫陈国元,
唐蔚,
吴宝金 and
date: 09/20/2022,
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在最后一组卵母细胞去核完并移到CZB液滴30分钟后,可进行下一步核移植操作。 (完整的去核以及核移植视频见视频A) 视频A.卵母细胞去核及体细胞核移植 在最后一组去核卵母细胞注射完并移到CZB液滴30分钟后,将所有的重构卵母细胞移至激活液液滴中,注意CZB中的钙会显著影响激活液对重构卵母细胞的激活 三、 供体细胞的准备核移植所用的供体细胞有很多,应当根据不同的细胞选择不同细胞准备方式,下面以卵丘细胞为例。 五、 卵母细胞体细胞核移植使用微量上样器从注射针的尾部向针内加入约2-3
猪体细胞核移植
Porcine Somatic Nuclear Transfer
Authors: 樊娜娜欧阳振,
王教伟,
赵宇,
赖良学 and
date: 11/20/2022,
view: 2549,
Q&A: 0
注核的步骤要分两步进行,操作时间长、难度大;而采用融合法时去核、注核使用相同直径的纤维操作针,去核、注核可以连续完成,此外,猪的卵母细胞可以通过电刺激激活,采用融合法在电融合的同时即可激活卵母细胞,因而,目前在猪的核移植研究中比较普遍的采用融合法进行核移植操作 成熟卵母细胞的去核
核移植前需要对成熟卵母细胞进行去核处理,以清除卵母细胞核遗传物质对克隆胚胎发育的干扰。 供体细胞的处理
处于G0期(静止期)和G2/M期的体细胞均可作为核移植供体细胞。G0期细胞的获得(血清饥饿法):
解冻细胞,铺于24孔板或4孔板中培养。 冰点
猪胚胎移植
Embryo Transfer
Authors: 樊娜娜赵宇,
欧阳振,
李昊,
赖良学 and
date: 12/20/2022,
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... 失败经验受体的同情发情时胚胎移植成功的关键,与正常受精胚胎相比核移植胚胎发育滞后,妊娠率也不同,一般在30%~80%之间。可选择核移植第二天发情受体进行胚胎移植。 如果移植的是核移植胚胎,考虑到植入胚胎质量不高,需要增加移植胚胎的数量以保证有足够的胚胎启动和维持妊娠。 目前,较为普遍的做法是核移植后培养18-22小时,选择形态良好的胚胎通过手术的方法移入受体输卵管中,每只受体移植100枚以上的重构胚胎。 结果与分析胚胎移植后24-26天进行B超监测妊娠情况,受精卵移植后妊娠率80%左右,核移植胚胎