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柑橘根际和根表微生物组样品的收集及核酸提取方法
A Protocol for Citrus Rhizosphere and Rhizoplane Microbiome Sample Collection and Nucleic Acid Extraction
Authors:
张云增
徐进
,
Riera Nadia
,
王年
and
date:
04/12/2021,
view:
3363,
Q&A:
0
按试剂盒说明书进行操作提取
微生物
组
的总RNA,共20个步骤。 该方法已应用于研究黄龙病对柑橘根部
微生物
组
的影响 (ref. 4,该研究受到Florida Citrus Research and Development Foundation的资助) 。 此步骤需在冰上或者冷室内操作并迅速完成,从
根
表面刷取土壤到将土壤置于LifeGuard soil preservation solution的时间要在2 min中内完成,避免土壤在空气中水分丧失和温度上升而对样品内
微生物
组成和基因表达产生明
植物微生物组DNA提取扩增及溯源分析
DNA Extraction, Amplification and Source-tracking Analysis for Plant Microbiomes
Authors:
熊 超
贺纪正
,
张丽梅
and
date:
04/27/2021,
view:
3868,
Q&A:
0
重复第6条步骤,分别探究叶内、
根
表
、
根
内等其他植物部位
微生物
组
的潜在来源。 例如首先探究叶
表
微生物
组
的来源,在metadata.txt文件中将'' SourceSink ''列下所有叶
表
样品命名为sink,其他潜在的来源如非
根
际土壤、
根
际土壤、
根
表
等样品命名为 ,所有来自叶
表
的样品分组名字为sink),其次可能的
水稻根系互作功能微生物的筛选方法
Screening Method of Functional Microorganisms Interacting with Rice Roots
Authors:
赵金彤
刘晓青
,
韩东飞
,
伍宁丰
,
田健
and
date:
04/27/2021,
view:
3846,
Q&A:
0
观察不同处理
组
的水稻生长情况,拍照记录,对比不同处理
组
的表型差异。将水稻幼苗从蛭石培养基质中小心地拨出,以减少对水稻根部和叶片的破坏。测定每盆水稻的
根
和茎的长度。 2)水稻
根
内
微生物
的筛选分离及纯化保存 将水稻根系清洗干净,称取1-2 g水稻
根
,用剪刀剪成小段于已灭菌的150 ml三角瓶中,加入50 ml 75%乙醇浸洗10 min,倒掉乙醇,用无菌水清洗3次,加入 50 μl扩增体系如表2:
表
2. 50 μl扩增体系如表3:
表
3. 1.2水稻根系功能
利用无菌植物和可培养细菌体系研究根系微生物组功能
Utilization of Axenic Plants and Cultivated Bacteria for Studying Root Microbiota’s Function
Authors:
徐浩然
张婧赢
,
曲宝原
,
刘永鑫
,
白洋
and
date:
04/27/2021,
view:
3683,
Q&A:
0
研究背景以群落形式聚集于植物
根
内或
根
表
的根系
微生物
组
(Microbiota) 以其促进植物生长、帮助植物营养吸收 (Zhang et al., 2019)、抵抗极端环境 (Xu et al., 2018 因此,研究根系
微生物
组
与植物间的关系有着重要价值。生态学方法通常直接研究植物与根系
微生物
的整体,这对于揭示自然环境中
微生物
组
的组成结构等至关重要。 挑选长势一致的植物无菌苗,使用无菌镊子将无菌苗从培养基中拔出,用无
微生物群落构建过程的空间可视化方法
Spatial Visualization of Microbial Community Assembly Processes
Authors:
闫慧贞
王凯
,
张德民
and
date:
02/10/2021,
view:
4660,
Q&A:
0
本教程用成对站位间不同颜色的连线来表示站位间的各类生态过程,操作步骤如下:示例数据来源 本教程描述的
微生物
群落构建过程空间可视化方法由本课题
组
首次提出并应用 (Wang et al., 2019),因此以该论文中的部分数据作为示例数据 XY ToLine工具 (Esri, Redlands, CA) 生成采样站位成对连线图层2.1
组
织采样站位经纬度
表
(使用Excel) 将站位经纬度坐标转换为十进制。 表格链接参数设置4.2
根
据群落构建过程为成对站位连线赋色 右击成对站位连线图层,“点集两两连接_XY
野外树木根系取样及根际土收集操作规程
Protocol for Sampling of Root and Rhizosphere Soils from Trees in Natural Fields
Authors:
何兴华
杨预展
,
袁志林
and
date:
03/25/2021,
view:
6887,
Q&A:
0
因此,研究树木细
根
的
根
际
微生物
对提高林木生产具有重要意义。 使用修枝剪剪取细
根
,每棵树木收集至少10 g根系样品。每个处理
组
至少5个生物学重复,一般推荐10个生物学重复。将收集的根系样本分装至无菌采样袋中并做好标记,密封保存。 收集的
根
际土壤样品可直接进行后续实验,或液氮速冻后,置于-80 °C超低温冰箱保存。图3.
根
际、
根
表
和内生示意图 (图片引自Edwards等, 2015)图4. 制定采样记录
表
,包括如下内容