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染色质免疫沉淀
Chromatin Immunoprecipitation
Authors:  姚艳黄勋 and date: 06/20/2019, view: 4620, Q&A: 0
... 1.2把解剖好的脂肪体放入装有200 μl预冷的PBS (含有1 mM PMSF和Protease Inhibitor Cocktail, Roche) 的1.5 ml的离心管中,并加入多聚甲醛使其终浓度为 冰箱旋转摇床金属浴锅高压蒸汽灭菌实验步骤本实验流程如下:样品制备1.1在预冷的磷酸盐缓冲液PBS (含有1 mM PMSF和Protease Inhibitor Cocktail, Roche) 中解剖50只果蝇三龄幼虫的脂肪体 , Wang, W., Liu, Z., Chen, J., Ding, M. and Huang, X
果蝇幼虫脂滴的标记观察
Drosophila Larva Lipid Droplet Staining
Authors:  赵雪璠黄勋 and date: 06/20/2019, view: 6147, Q&A: 2
... 配制好的溶液于4 °C保存参考文献Liu, Y., Wang, W., Shui, G. and Huang, X. (2014). 野生型果蝇三龄幼虫脂肪体脂滴染色. 蓝色荧光标示染料DAPI着色的细胞核;绿色荧光标示中性脂染料着色的脂滴;放大倍数:40倍。 室温条件下,用解剖镊解剖,分离出脂肪体。将分离好的组织放于含有PBS缓冲液的染色皿中。 吸干PBS缓冲液,用4%多聚甲醛 (PFA) 在室温下固定30
果蝇翅成虫盘免疫荧光染色
Immunofluorescence Staining in Drosophila Wing Imaginal Discs
Authors:  高远刘敏, 朱健 and date: 06/20/2019, view: 6609, Q&A: 0
... 用镊子将前半部分以头部为支点,将整个身体内外翻转,暴露出果蝇身体内部的消化道、唾液腺、脂肪体、气管、成虫盘等组织,将脂肪体、消化道和唾液腺摘除 (图1)。 溶液配方PBST 1× PBS 0.1% Triton X-100PBST-BSA 1× PBS 0.1% Triton X-100 0.2% BSA致谢本实验室的工作得到细胞增殖与分化重点教育部重点实验室 随后去掉多余的脂肪体 (图中黄色箭头所示)。E. 清理干净后的果蝇幼虫,可看到其翅成虫盘 (图中蓝色箭头所示) 挂在气管上,形态完整。此时
果蝇脂肪组织高压冷冻-冷冻替代透射电镜 (HPF-FS TEM)
High Pressure Freezing-freezing Substitution Transmission Electron Microscope (HPF-FS TEM) of Drosophila Fat Tissue
Authors:  丁隆黄勋 and date: 06/20/2019, view: 5857, Q&A: 0
... Microsystems AFS-2冷冻替代仪Leica Ultracut UCT切片机JEM-1400 TEM电子显微镜Gatan832 4k × 2.7k CCD烘箱实验步骤在1× PBS中解剖出来的三龄幼虫脂肪体进入 , Tian, H., Liang, J., Zhang, F., Wang, G., Wang, Y., Ding, M., Shui, G. and Huang, X. (2018). ,加水至1 L 分装后在15 psi (1.05 kg/cm2) 高压蒸汽灭菌20 min,或通过过滤除菌,保存至室温样品替代液 2%四氧化锇
果蝇幼虫脂肪组织糖类代谢流示踪
The Metabolic Flux Tracing of Carbohydrate in Drosophila Larval Fat Tissue
Authors:  丁隆黄勋 and date: 06/20/2019, view: 3489, Q&A: 0
... 对于每个检测点,15只三龄幼虫 (雌雄随机) 的脂肪体被解剖出来并置于未标记培养基中 (9孔康宁玻璃板) 平衡15分钟,然后快速转移至标记培养基中孵育指定的时间。 H., Li, X. J., Su, B. and Shui, G. (2016). Oncotarget 7(35): 55970-55989.Li, X., Chung, A. C. , Tian, H., Liang, J., Zhang, F., Wang, G., Wang, Y., Ding, M., Shui, G. and Huang, X