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高通量原位X射线衍射技术鉴定蛋白质晶体
High Throughput Identifying of Protein Crystals by In-situ X-ray Diffraction Technique
Authors:
王乐乐
范仕龙
and
date:
12/10/2021,
view:
2255,
Q&A:
0
蛋白
晶体
和盐晶的衍射图对比如图10中的右图所示的盐晶的衍射点在高分辨率区较强,低分辨率区几乎没衍射点,而左图中的蛋白
晶体
的衍射点刚好相反,两者有明显的区别,通过这个规律可以区分
鉴定
蛋白质
晶体
和盐晶。 原位X射线衍射: 经过上面的步骤,从结果图片中找到一个有
晶体
的Drop,在图片上将鼠标移到
晶体
的位置,右键选择Long: 20 min,6×0.5 deg(如图5所示),此项曝光时间20 min,可以
鉴定
出
晶体
是否为蛋白
晶体
Rock Imager的高通量晶体观察和确认
High Throughput Crystal Observation and Confirmation of Rock Imager
Authors:
陈喜玲
范仕龙
and
date:
12/10/2021,
view:
1948,
Q&A:
0
晶体
板某一时间拍摄的
晶体
图片图17. 某一个drop拍摄的
晶体
图片1.2蛋白
晶体
与盐晶
鉴定
。 在拍摄后的
晶体
图片观察中,使用可见光拍摄后,无法确定是否为蛋白
晶体
,可以使用仪器进行紫外光和偏正光的拍摄,进一步进行
鉴定
。 偏光显微镜是利用光的偏振特性对具有双折射性的物质进行研究
鉴定
。双折射性是
晶体
的基本特征,因此可以使用偏光显微镜区分
晶体
与非结晶物质。 三个不同的蛋白初筛
晶体
图片2.2
蛋白质晶体高通量筛选制备方法
High Throughput Screening Method for Preparation of Protein Crystals
Authors:
王乐乐
范仕龙
and
date:
12/10/2021,
view:
3757,
Q&A:
0
结果与分析实验结果选取了采用Swissci的96孔坐滴板进行溶菌酶结晶筛选结果作为代表,使用
晶体
观察设备拍摄了筛选出来的
晶体
图片,图片结果如下图7所示,这些结果可供后续进行蛋白
晶体
的
鉴定
和衍射实验,以及数据收集和结构解析实验 图11.蛋白的一种沉淀状态确定蛋白溶液的稳定性: 除了蛋白浓度这一因素,
蛋白质
在溶液中的聚合状态和稳定性也会影响
蛋白质
的结晶,如果某种蛋白在经过大量条件筛选之后依然没有筛选出结晶条件,那么可以尝试通过平台的多参数
蛋白质
稳定性检测仪 致谢本文得到清华