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肠道固有淋巴样细胞亚群分类及表型检测
Classification and Phenotype Analysis of Mouse Intestinal Innate Lymphoid Cells (ILCs)
Authors:  章晶晶沈蕾 and date: 11/20/2019, view: 13567, Q&A: 2
；2)流式抗体问题，如果抗体本身由于克隆号或者过期等原因导致抗体失效，则建议更换抗体；3)流式染色和上机分析问题，建议对比其他表型检测有无问题，如果其他抗体检测正常则可排除流式操作的问题。 除此以外，根据已有的研究发现，ILC2还表达OX40、PD-1等蛋白，参与适应性免疫调控等多种生理过程，本文不再一一描述，实验者可根据实验目的自行调整染色方案，检测固有淋巴样细胞的表型。 肠道二型固有淋巴样细胞表型分析. 所有流式图的细胞来自lineage-CD45.2+CD90.2+CD127+淋巴
基于荧光染料的珊瑚共生菌的群落组成及表型检测
Community Composition and Phenotypic Detection of Coral Symbiotic Bacteria Based on Fluorescent Dyes
Authors:  卢余盛钟春莲, 贾力, 陈建明 and date: 11/20/2019, view: 3423, Q&A: 0
上样检测：7.1流式细胞仪校准和实验模板建立：在进行样本检测之前，先按照标准程序对流式细胞仪进行开机、无菌清洗，并通过CS&T微球对流式细胞仪进行追踪校准和稳定性检测。 流式细胞仪分析珊瑚细胞群落. a.横坐标为前向散射光(Forward scatter, FSC)，主要体现检测细胞的大小，纵坐标为侧向散射光(Side scatter, SSC)，主要体现检测细胞所含内容物的多少 c.分析b图中活细胞在近红外是否有自发荧光，检测珊瑚细胞是否含有共生藻类 (Rosental 等，2
蝴蝶和甲虫CRISPR/Cas9基因编辑技术
CRISPR/Cas9 Gene Editing Technology in Butterflies and Beetles
Authors:  刘贵春何金武, 董志巍, 赵若苹, 王文, 李学燕 and date: 08/25/2021, view: 3434, Q&A: 1
... 表型检测 胚胎敲除率检测：选取注射了4天已经发育的20颗卵直接进行PCR克隆检测，检测敲除率，对敲除率高的基因，继续饲养幼虫观察表型，而对敲除率低的基因重新调整注射比例或者重新设计靶点进行注射。 表型检测 胚胎敲除率检测：选取注射了14天已经发育的20颗卵进行直接PCR克隆检测，检测敲除率，对敲除率高的基因，继续饲养幼虫观察表型，而对敲除率低的基因重新调整注射比例或者重新设
全基因组siRNA法筛选环形RNA的反式调控因子
Genome-wide siRNA Screen for trans-factors of Circular RNA Regulation
Authors:  李响陈玲玲 and date: 06/01/2021, view: 2873, Q&A: 0
... 确定最适转染条件为：在384孔板中，使用LipofectamineTM RNAiMAX 0.1 μl/孔，细胞接种密度 500个/孔，转染48 h后，加入1 μg/mL dox诱导24 h，然后进行荧光表型检测 三、表型检测加入Dox 24 h后，使用PBS及自动洗板机ELx405清洗细胞3次 (抽吸30 μl 1x PBS并补充新的30 μl 1x PBS，重复3次)，最后将培养基置换为1x
全基因组siRNA法筛选长非编码RNA NEAT1的转录调控因子
Genome-wide siRNA Screen for Transcription Regulators of Long Noncoding RNA NEAT1
Authors:  王洋陈玲玲 and date: 07/07/2021, view: 2180, Q&A: 0
... 经转染优化实验，确定最适转染条件为：在384孔板中，使用LipofectamineTM RNAiMAX 0.1μL/孔，转染体系10μL，细胞接种密度 500个/孔，转染72 h后进行表型检测。 三、表型检测转染72 h后，使用PBS及自动洗板机ELx405清洗细胞3次 (抽吸30 μL 1x PBS并补充新的30 μL 1x PBS，重复3次)，最后将培养基置换为1x PBS；此步骤的目的是降低由培养基导致的成像背景信号值过高 传统的外源性的小干扰RNA (small interference RNAs, siR
高通量siRNA文库筛选体系的建立及优化
High-Throughput siRNA Library Screening Assay Development and Optimization
Author:  韩帅date: 10/22/2021, view: 4006, Q&A: 0
... 本文将重点介绍建立及优化表型检测体系的重点考虑因素。 针对所关注的表型进行整板检测，常用的两类检测手段包括多功能酶标仪读值或高内涵成像分析仪获取图像并定量图像分析。 第二轮复筛的策略，一般使用针对同一个基因所设计的多条独立siRNA进行验证筛选，采用的检测手段可以跟第一轮初筛相同，也可以选择跟所关注表型相关的另外一种检测指标，后者更有利于排除初筛的假阳性结果。 图2. siRNA文库筛选操作步骤对于筛选者而言，预实验阶段需要摸索的条件主要是si
免疫荧光成像筛选胞质染色质片段产生的潜在调控因子
Screening Regulatory factors for Production of Cytoplasmic C hromatin Fragments by Immunofluorescence
Authors:  罗群付雨栋, 韩帅, 王涛 and date: 01/10/2022, view: 2793, Q&A: 0
... 经过预实验的多次优化，确定最适转染条件为：在384孔板中，使用Dharma FECT1 Transfection Reagent 0.075 μl /孔，细胞接种密度2,000个/孔，转染72
细胞周期调控因子筛选---FUCCI活细胞标记法
Screening for Cell Cycle Regulators-FUCCI Live Cells Labeling Method
Authors:  鲁家骏韩帅, 杨巍维 and date: 09/05/2021, view: 4396, Q&A: 1
... 二、 siRNA文库转染 经转染优化实验，确定最适转染条件为：在384孔板中，使用DharmaFECT1 0.05 μl/孔，细胞接种密度 650个/孔，转染72 h后进行表型检测 (见注意事项9)。 用流式检测仪检测单克隆细胞的Hoechst/mKO2/mAG的信号，根据mKO2/mAG荧光的分布，hoechst33342信号指示的细胞周期分布挑选出最适合用来筛选的单克隆细胞株 (见注意事项7，8) 转染过程需要优化的条件有转染试剂的种类，转染试剂的用量，孔内细胞数量，确定最终检测的时间点等。