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细胞增殖的EdU荧光标记法
EdU Fluorescence Labeling for Cell Proliferation
Authors:  何璐薇赵宏伟, 林谋斌 and date: 08/06/2021, view: 9109, Q&A: 0
内涵成像 将96孔板板底用擦镜纸擦拭后,置于内涵细胞成像分析仪Operetta进行荧光成像及图像分析。 EdU/Hoechst 33342荧光标记后,利用内涵细胞成像分析仪采集荧光信号(图1)。 EdU染色可标记处于细胞周期S期的细胞,结合内涵细胞
全基因组siRNA法筛选环形RNA的反式调控因子
Genome-wide siRNA Screen for trans-factors of Circular RNA Regulation
Authors:  李响陈玲玲 and date: 06/01/2021, view: 2823, Q&A: 0
... 使用Operetta内涵成像分析仪对清洗后的384板成像 (10倍长工作距离物镜,GFP和mCherry双通道) (图3)。 Addgene, 产品目录号: #12260)pMD2.G (Addgene, 产品目录号: #12259)84消毒液Phosphate buffered saline (PBS) 缓冲液 (见溶液配方)仪器设备内涵细胞成像分析仪 Operetta (PerkinElmer,Ope
小胶质细胞吞噬Aβ (微球颗粒) 能力评估
The Cytophagy of Aβ Microsphere Particles by Microglia
Author:  王瑛date: 11/18/2021, view: 3201, Q&A: 2
内涵成像 将96孔板底用擦镜纸拭后,置于内涵细胞成像分析仪进行荧光成像及分析。利用10x物镜,添加红色、绿色成像通道,选择空白孔、阳性对照孔调整曝光时间、激发光强度进行实验拍摄。 BV2细胞培养基成分 10%FBS + DMEM/F12 + 1%双抗,4 °C保存致谢感谢国家蛋白质中心复合激光显微镜系统提供内涵细胞分析仪
全基因组siRNA法筛选长非编码RNA NEAT1的转录调控因子
Genome-wide siRNA Screen for Transcription Regulators of Long Noncoding RNA NEAT1
Authors:  王洋陈玲玲 and date: 07/07/2021, view: 2134, Q&A: 0
... 使用Operetta内涵成像分析仪对清洗后的384板成像 (10倍长工作距离物镜,GFP和mCherry双通道)。 #12260)pMD2.G (Addgene, catalog number: #12259)84消毒液Phosphate buffered saline (PBS) 缓冲液 (见溶液配方)仪器设备内涵细胞成像分析仪 Operetta (PerkinElmer,Operetta
神经干细胞诱导分化形成的神经元及神经网络的定量分析
The Quantitative Analysis of Neuronal Structure
Authors:  孔娟王瑛 and date: 12/07/2021, view: 1618, Q&A: 0
致谢感谢国家蛋白质中心复合激光显微镜系统提供内涵细胞分析仪的设备及技术人员的辅助。 :平均轴突长度 B:平均节点数目 C:平均轴突数目 D 分化成神经元(轴突数大于1)的细胞比例内涵成像部分 1. 将96孔板用擦镜纸擦拭板底后,放入内涵仪器中进行成像。 2. (Eppendorf, C 170i)离心机(Eppendorf, 5810 R,)全自动细胞计数仪(Counts
EU标记法测定细胞RNA合成
EU Labelling Method for RNA Synthesis Detection of Cells
Authors:  鲁家骏韩帅, 杨巍维 and date: 11/25/2021, view: 3879, Q&A: 1
加入100 μl Wash Buffer,用opera内涵细胞分析仪拍照分析细胞RNA合成情 况。 感谢中科院生化与细胞所化学生物学技术平台在内涵成像分析实验中给予的帮助。参考文献Jao, C. Y. and Salic, A. (2008). Total DNA Stain (1000x) Actinomycin D (100x)DMEM培养基 (Hyclone, catalog number: SH3002201)PBS (
细胞周期调控因子筛选---FUCCI活细胞标记法
Screening for Cell Cycle Regulators-FUCCI Live Cells Labeling Method
Authors:  鲁家骏韩帅, 杨巍维 and date: 09/05/2021, view: 4310, Q&A: 1
内涵细胞分析仪Operetta拍摄细胞图像。 感谢中科院生化与细胞所化学生物学技术平台在高通量siRNA文库筛选及内涵成像分析实验中给予的帮助,感谢细胞分析技术平台在流式细胞实验中给予的帮助。 LSR II)自动化分液仪 (Thermo Fisher, Multidrop Combi)洗板机 (BioTek, ELx405 Select Deep Well Microplate Washer)
高通量siRNA文库筛选体系的建立及优化
High-Throughput siRNA Library Screening Assay Development and Optimization
Author:  韩帅date: 10/22/2021, view: 3909, Q&A: 0
... 针对所关注的表型进行整板检测,常用的两类检测手段包括多功能酶标仪读值或内涵成像分析仪获取图像并定量图像分析。 建立内涵筛选体系时需要考虑的重要因素可参考本手册中《内涵检测体系优化方法》一文及《内涵成像及定量分析实验手册》。 基于读值的筛选速度快、通量,但得到的信息相对较少;基于成像内涵筛选体系速度慢、对图像
免疫荧光成像筛选胞质染色质片段产生的潜在调控因子
Screening Regulatory factors for Production of Cytoplasmic C hromatin Fragments by Immunofluorescence
Authors:  罗群付雨栋, 韩帅, 王涛 and date: 01/10/2022, view: 2739, Q&A: 0
(见溶液配方)仪器设备Multidrop Combi 自动分液器(Thermo Fisher Scientific)Blue Washer洗板机Operetta内涵成像分析仪仪器如图: 水平离心机实验步骤一 , 0.1%)洗二抗,洗三次,15 min/每次;DAPI(1 mg/ml), 用PBS稀释DAPI(1:1,500),每孔15 μl,室温孵育30 min,PBS洗10 min,孔里加入PBS后应用内涵仪器进行拍照 转染前细胞状态图片,转染siRNA后65 h
蛋白-蛋白相互作用检测技术-双分子荧光互补法
Protein-Protein Interaction Detection Method-BiFC
Authors:  岳丽云李露, 陈晓慧, 兰姝珏 and date: 12/07/2021, view: 4695, Q&A: 0
... (Essen BioScience,model:Incucyte FLR)Operretta内涵成像分析仪(PerkinElmer,model:Operretta)96孔板离心机(Eppendorf, Operretta 拍照检测 染色后的细胞板置于Operretta内涵细胞分析仪中进行拍照分析,激光通道为:EGFP(460nm-490nm)、HOECHST33342(360nm-400nm)、Propidium )仪器设