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细胞增殖的EdU荧光标记法
EdU Fluorescence Labeling for Cell Proliferation
Authors:
何璐薇
赵宏伟
,
林谋斌
and
date:
08/06/2021,
view:
9109,
Q&A:
0
高
内涵
成像
将96孔板板底用擦镜纸擦拭后,置于
高
内涵
细胞
成像
分析仪
Operetta进行荧光
成像
及图像分析。 EdU/Hoechst 33342荧光标记后,利用
高
内涵
细胞
成像
分析仪
采集荧光信号(图1)。 EdU染色可标记处于
细胞
周期S期的
细胞
,结合
高
内涵
细胞
全基因组siRNA法筛选环形RNA的反式调控因子
Genome-wide siRNA Screen for
trans
-factors of Circular RNA Regulation
Authors:
李响
陈玲玲
and
date:
06/01/2021,
view:
2823,
Q&A:
0
... 使用Operetta
高
内涵
成像
分析仪
对清洗后的384板
成像
(10倍长工作距离物镜,GFP和mCherry双通道) (图3)。 Addgene, 产品目录号: #12260)pMD2.G (Addgene, 产品目录号: #12259)84消毒液Phosphate buffered saline (PBS) 缓冲液 (见溶液配方)仪器设备
高
内涵
细胞
成像
分析仪
Operetta (PerkinElmer,Ope
小胶质细胞吞噬Aβ (微球颗粒) 能力评估
The Cytophagy of Aβ Microsphere Particles by Microglia
Author:
王瑛
date:
11/18/2021,
view:
3201,
Q&A:
2
高
内涵
成像
将96孔板底用擦镜纸拭后,置于
高
内涵
细胞
成像
分析仪
进行荧光
成像
及分析。利用10x物镜,添加红色、绿色
成像
通道,选择空白孔、阳性对照孔调整曝光时间、激发光强度进行实验拍摄。 BV2
细胞
培养基成分 10%FBS + DMEM/F12 + 1%双抗,4 °C保存致谢感谢国家蛋白质中心复合激光显微镜系统提供
高
内涵
细胞
分析仪
的
全基因组siRNA法筛选长非编码RNA
NEAT1
的转录调控因子
Genome-wide siRNA Screen for Transcription Regulators of Long Noncoding RNA
NEAT1
Authors:
王洋
陈玲玲
and
date:
07/07/2021,
view:
2134,
Q&A:
0
... 使用Operetta
高
内涵
成像
分析仪
对清洗后的384板
成像
(10倍长工作距离物镜,GFP和mCherry双通道)。 #12260)pMD2.G (Addgene, catalog number: #12259)84消毒液Phosphate buffered saline (PBS) 缓冲液 (见溶液配方)仪器设备
高
内涵
细胞
成像
分析仪
Operetta (PerkinElmer,Operetta
高
神经干细胞诱导分化形成的神经元及神经网络的定量分析
The Quantitative Analysis of Neuronal Structure
Authors:
孔娟
王瑛
and
date:
12/07/2021,
view:
1618,
Q&A:
0
致谢感谢国家蛋白质中心复合激光显微镜系统提供
高
内涵
细胞
分析仪
的设备及技术人员的辅助。 :平均轴突长度 B:平均节点数目 C:平均轴突数目 D 分化成神经元(轴突数大于1)的
细胞
比例
高
内涵
成像
部分 1. 将96孔板用擦镜纸擦拭板底后,放入
高
内涵
仪器中进行
成像
。 2. (Eppendorf, C 170i)离心机(Eppendorf, 5810 R,)全自动
细胞
计数仪(Counts
EU标记法测定细胞RNA合成
EU Labelling Method for RNA Synthesis Detection of Cells
Authors:
鲁家骏
韩帅
,
杨巍维
and
date:
11/25/2021,
view:
3879,
Q&A:
1
加入100 μl Wash Buffer,用opera
高
内涵
细胞
分析仪
拍照分析
细胞
RNA合成情 况。 感谢中科院生化与
细胞
所化学生物学技术平台在
高
内涵
成像
分析实验中给予的帮助。参考文献Jao, C. Y. and Salic, A. (2008). Total DNA Stain (1000x) Actinomycin D (100x)DMEM培养基 (Hyclone, catalog number: SH3002201)PBS (
细胞周期调控因子筛选---FUCCI活细胞标记法
Screening for Cell Cycle Regulators-FUCCI Live Cells Labeling Method
Authors:
鲁家骏
韩帅
,
杨巍维
and
date:
09/05/2021,
view:
4310,
Q&A:
1
用
高
内涵
细胞
分析仪
Operetta拍摄
细胞
图像。 感谢中科院生化与
细胞
所化学生物学技术平台在高通量siRNA文库筛选及
高
内涵
成像
分析实验中给予的帮助,感谢
细胞
分析技术平台在流式
细胞
实验中给予的帮助。 LSR II)自动化分液仪 (Thermo Fisher, Multidrop Combi)洗板机 (BioTek, ELx405 Select Deep Well Microplate Washer)
高通量siRNA文库筛选体系的建立及优化
High-Throughput siRNA Library Screening Assay Development and Optimization
Author:
韩帅
date:
10/22/2021,
view:
3909,
Q&A:
0
... 针对所关注的表型进行整板检测,常用的两类检测手段包括多功能酶标仪读值或
高
内涵
成像
分析仪
获取图像并定量图像分析。 建立
高
内涵
筛选体系时需要考虑的重要因素可参考本手册中《
高
内涵
检测体系优化方法》一文及《
高
内涵
成像
及定量分析实验手册》。 基于读值的筛选速度快、通量
高
,但得到的信息相对较少;基于
成像
的
高
内涵
筛选体系速度慢、对图像
免疫荧光成像筛选胞质染色质片段产生的潜在调控因子
Screening Regulatory factors for Production of Cytoplasmic C hromatin Fragments by Immunofluorescence
Authors:
罗群
付雨栋
,
韩帅
,
王涛
and
date:
01/10/2022,
view:
2739,
Q&A:
0
(见溶液配方)仪器设备Multidrop Combi 自动分液器(Thermo Fisher Scientific)Blue Washer洗板机Operetta
高
内涵
成像
分析仪
仪器如图: 水平离心机实验步骤一 , 0.1%)洗二抗,洗三次,15 min/每次;DAPI(1 mg/ml), 用PBS稀释DAPI(1:1,500),每孔15 μl,室温孵育30 min,PBS洗10 min,孔里加入PBS后应用
高
内涵
仪器进行拍照 转染前
细胞
状态图片,转染siRNA后65 h
蛋白-蛋白相互作用检测技术-双分子荧光互补法
Protein-Protein Interaction Detection Method-BiFC
Authors:
岳丽云
李露
,
陈晓慧
,
兰姝珏
and
date:
12/07/2021,
view:
4695,
Q&A:
0
... (Essen BioScience,model:Incucyte FLR)Operretta
高
内涵
成像
分析仪
(PerkinElmer,model:Operretta)96孔板离心机(Eppendorf, Operretta 拍照检测 染色后的
细胞
板置于Operretta
高
内涵
细胞
分析仪
中进行拍照分析,激光通道为:EGFP(460nm-490nm)、HOECHST33342(360nm-400nm)、Propidium )仪器设