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微生物群落胞内/胞外吸附/胞外游离水环境DNA的分离提取
Isolation and Extraction of Intracellular, Absorbed-extracellular and Free-extracellular Environmental DNA from Aquatic Microbial Community
Authors:  赵泽鞠峰 and date: 12/25/2020, view: 7646, Q&A: 0
... 3.2将3.1所有离心管中所得沉淀分别用300 μlTE buffer重悬,所有离心管中的悬浊液全部转移至1个15 ml离心管中。 溶液配方CTAB提取液 (pH 8.0) 50 mM Tris 10 mM EDTA 1% CTABTE buffer (pH 8.0) 10 mM Tris-HCl 0.1 mM EDTA 1 M RNase-Free Distilled Water (Thermo, catalog number: 10977023)Qubit检测试剂 (
Southern印记杂交
Southern Blot
Authors:  吴昊陈太钰, 林拥军, 陈浩 and date: 06/12/2018, view: 11860, Q&A: 0
... 20x SSC) 88.23 g Tris-sodian citrate (柠檬酸钠) (国药) 175.32 g NaCl 先加大约800 ml H2O使其溶解,此时pH应在7-8之间,定容至1 L (盐溶液 5.2将凝胶小心地推到桥上,玻璃棒赶走桥与凝胶之间的气泡,用移液器吸转膜液滴在胶面上及其四周,整个过程要保持胶和桥湿润。 3)用移液器吸转膜液湿润第一张桥,然后按同样的方法在第一张桥上铺第二层滤纸。用玻璃棒赶气泡,平整滤纸。 3.5两张用作
利用Biacore 8K从哺乳动物细胞上清中快速筛选高亲和力抗体
Rapid Screening of High-affinity Antibodies from Mammalian Cell Supernatants Using Biacore 8K
Authors:  李昕贺娟华, 樊峥 and date: 10/19/2023, view: 1640, Q&A: 0
该补料液含有细胞生长所需的氨基酸,无机等必需营养成份,可大量提高细胞的蛋白和抗体的产量。 利用传统筛选方法只能定性分析抗体与抗原是否结合,无法得到抗体与抗原的亲和力,亦无法比较不同抗体之间的亲和力差异,本文利用Biacore8K对点突变的抗体进行快速筛选,并可以比较不同抗体的亲和力,从而可以筛选出亲和力的抗体 SDA-PAGE电泳检测蛋白大小及纯度:将上述收集的每管蛋白分别取20 μL于两个新的1.5 mL EP管中,加入5 μL 5× loading buffer及 5× loading buffer(+DTT 二、