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果蝇Schneider 2细胞培养
Culturing Drosophila Schneider 2 Cells
Authors:  龙婷刘敏, 朱健 and date: 06/20/2019, view: 11589, Q&A: 2
准备干净的细胞培养瓶一个,加入室温的培养基4 ml。2.2从液氮中取出一管冻存的S2细胞,在25 °C恒温水浴锅中用手轻柔摇晃。 (SANYO, MCO-18AIC):有恒温和保湿功能即可,温度设定为25 °C,湿度设定为70%,果蝇S2细胞培养不需要通入CO2气体真空泵 (Millipore, WP6122050)倒置荧光显微镜 细胞复苏 S2细胞不是可以无限传代的细胞,一般培养到20~25代的时候需要复苏新的细胞。此时的细胞形态差,贴壁比例降低,生长慢,转染效率低。2.1预热25 °C恒温水浴锅。 I
果蝇Schneider 2细胞免疫荧光染色
Immunohistochemistry of Drosophila Schneider 2 Cell
Authors:  张乐冰刘敏, 朱健 and date: 06/20/2019, view: 5430, Q&A: 0
... 2.3吸去多聚赖氨酸或刀豆蛋白A溶液 (可回收使用),待盖玻片干透后,加入500 μl吹吸混匀的细胞培养液。把24孔细胞培养板放回细胞培养箱,等待细胞贴附在盖玻片上。 多聚赖氨酸可以使S2细胞贴附盖玻片的同时保持其球状的细胞形态。刀豆蛋白A在使S2细胞贴壁的同时也会使其扁平延展 (Rogers等,2002)。2.1准备圆形盖玻片若干,用75%酒精清洗后晾干。 结果显示Misshapen蛋白主要分布在S2细胞的细胞质中 (图1)。图1. 细胞的免疫组化染色3.1取出24孔细胞培养
Nano-injection注射方法构建DCV果蝇感染模型
Using Nano-injection to Prepare Models of DCV Infected Drosophila
Authors:  赵娅娅俞珺璟, 潘磊 and date: 06/20/2019, view: 8254, Q&A: 0
... 直接在步骤1.1准备好的含有S2*细胞的10 ml完全培养基中加入1 ml的DCV病毒溶液,MOI = 0.01。将细胞置于25 °C昆虫细胞培养箱中培养。 感染前一天,用无抗生素的Schneider果蝇培养基 + 10% FBS将S2*细胞铺板于d = 10 cm细胞培养皿,密度为1 × 107 cells/ml。 果蝇S2*细胞用于DCV增殖和滴定。S2* (S2 Star cell) 细胞系是从晚期果蝇胚胎的原代培养物中获得的 (Schneider,197
果蝇Schneider 2细胞磷酸钙法转染
Ca-phosphate-mediated Transient Transfection method in Drosophila S2 Cells
Authors:  刘爱国刘敏, 朱健 and date: 06/20/2019, view: 6177, Q&A: 0
... 材料与试剂6孔细胞培养板 (Thermo Fisher Scientific, Nunc, catalog number: 140675)24孔细胞培养板 (Thermo Fisher Scientific S2细胞生长密度达到90% (左) 和40% (右)取1.5 ml离心管,将3 μg左右的质粒或RNA稀释在100 μl 0.25 M CaCl2中。 , Nunc, catalog number: 142475)1.5 ml塑料离心管 (Corning, AXYGEN, catalog number: MCT-150-C)果蝇