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果蝇肠道损伤检测方法--蓝精灵实验
Smurf Assay to Detect
Drosophila
Intestine Leakage
Authors:
俞珺璟
杨烁
,
潘磊
and
date:
06/20/2019,
view:
10285,
Q&A:
1
同理,在幼虫时期也可以使用该
方法
来指征果蝇肠道的完整性 (He等,2017) (图1)。图1. 因肠道出现渗漏后,蓝色染料浸满全身,果蝇形似蓝精灵,因此,此
实验
命名为蓝精灵
实验
,
实验
结果以呈现蓝精灵果蝇的数目除以总数目乘以100%,以指征肠道渗漏果蝇的比例数。 对于同一种基因型果蝇的同样处理,至少需要三管作为平行
实验
,且至少需要三次独立
实验
重复。注意事项成虫果蝇可以提前饥饿脱水2小时,再喂食染料,将会极大提高摄入率和缩短观察时间。 本文
实验
方案改编自本
实验
果蝇肠上皮损伤再生模型实验方法
A Method for Damage-induced Regeneration of the Intestinal Epithelium in
Drosophila
Authors:
胡九龙
袭荣文
and
date:
06/20/2019,
view:
7071,
Q&A:
0
结果与分析本
实验
方法
参考Amcheslavsky等 (2009) 和Chen等 (2016b) 发表的论文。果蝇肠道是由平滑肌围裹的单层管状上皮结构构成。 DSS处理的果蝇肠道ISC和EB细胞增多 注意事项
实验
用DSS的分子量比较关键,根据我们的经验40 KDa的效果比较好。5% DSS处理的两天一般为损伤期,处理后1~2天一般为恢复期。 对照组果蝇空管中滴加500 μl 5%的葡萄糖溶液的色谱层析滤纸 (大小为2.5 cm × 3.75 cm);
实验
组果蝇管中滴加500 μl 5% DSS和500 μl 5%葡萄糖溶液的
Arabidopsis
Stomatal Opening and Closing Experiment
研究拟南芥气孔开放与关闭的实验方法
Author:
Zhixin Zhao
date:
05/20/2011,
view:
19155,
Q&A:
1
然后将培养板置于黑暗中至少2.5小时,以确保大多数气孔完全关闭ABA治疗转移培养板的光,在平均时间加入50μMABA(20℃,450μmol/m 2/s),处理至少2小时以确保大部分控制的气孔完全打开剥离
实验
气孔关闭
高通量分析果蝇节律的实验方法
A High-Throughput Method for Assaying Locomotor Activity to Study Circadian Rhythms in
Drosophila
Authors:
郑刘彬
张珞颖
and
date:
06/20/2019,
view:
6473,
Q&A:
1
注:转换数据格式时尽量均以所要分析数据第一天为开始日期,便于后期不同批次
实验
数据结合。 果蝇活动监测系统 (Trikinetics, Waltham, MA, USA)高压蒸汽灭菌器 (日本松下,model: MLS-3751L-PC)体式显微镜
高通量分析果蝇睡眠的实验方法
A High-Throughput Method Assaying Locomotor Activity to Study Sleep in
Drosophila
Authors:
郑刘彬
张珞颖
and
date:
06/20/2019,
view:
6813,
Q&A:
1
注:转换数据格式时尽量均以所要分析数据第一天为开始日期,便于后期不同批次
实验
数据结合。 注:监测睡眠
实验
中,7天LD中前3天是果蝇适应环境的时间,分析结果时只采用后4天LD的数据;4天LL会导致果蝇生物钟不能正常工作,因此可以根据LL第四天和DD第一天数据分析果蝇在生物钟功能缺陷时的睡眠, 分析睡眠数据 睡眠数据分析使用Ravi Allada
实验
室的Counting Macro (版本:5.19.13),果蝇睡眠定义为5 min不活动,通过Counting Macro分析可以得到睡眠长度、 果蝇行为监测系统 (Trikinetics, Wa
Very Low Molecular Weight Proteins Electrophoresis Protocol
极低分子量蛋白电泳实验方法
Authors:
César E. Rivera
José D. Rosales
,
Juan C. Freites-Perez
,
Eliaira Rodriguez
and
date:
11/20/2018,
view:
15041,
Q&A:
5
最常用的方案也称为Laemmli
方法
,该
方法
是指Laemmli于1970年(Ornstein,1964)建立的该技术的第一个公布协议。 该
方法
将在该工作中进行解释,并使用1KDa和0.6KDa蛋白质作为样品进行说明。 “使用不连续聚丙烯酰胺凝胶作为载体介质分离和变性蛋白质的一种非常常见的电泳
方法
称为十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)。 不同的染色
方法
可用于检测稀有蛋白质并解决其生化特性。 Rath在她的工作中比较了参比蛋白在不同凝胶浓度下的迁移,凝胶范围为11-18%,在约6KDa的分子