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实验用果蝇的饲养及管理
Guidance for Drosophila Culture and Management
Authors:  王霞 沈达 , 乔欢欢 , 孙锦 , 徐荣刚 , 刘清飞 , 倪建泉 and date: 06/20/2019, view: 20587, Q&A: 2
使用果蝇杂交时,每管可放雌雄果蝇各5~8只;使用果蝇杂交时,每瓶可放雌雄果蝇各15~20只。若果蝇繁殖力较弱,可适当增加初始果蝇数量。4)杂交果蝇需准确标记雌、雄亲代的基因型,以及杂交时间。 5)进行复杂的杂交实验时 (如基因型整合),所需表型的果蝇往往只占子代总数的小部分,并且可能由于携带多种基因突变、转基因和平衡子等,生活力和繁殖力较弱;故在杂交
果蝇组织荧光原位杂交
Fluorescence in Situ Hybridization of Drosophila Tissues
Author:  刘冀珑date: 06/20/2019, view: 6154, Q&A: 0
三、果蝇组织即速荧光原位杂交在Grace’s Insect Medium中解剖果蝇 (解剖方法参见:吴铮和刘冀珑 [2019];Tastan和Liu [2015])。 使用移液器把杂交后的组织和15 μl左右的杂交混合液转移至盖玻片上。如果组织太大,需要把移液枪头末端用锋利的刀片切去末端,使得开口足够大。将载玻片轻轻压在盖玻片上,注意同时接触到盖玻片四角的凡士林。 将样品放入杂交混合液,储存在-20 °C原位混合液中 (样品可储存数月至数年),或执行第5步。 果蝇组织免
果蝇体内RNAi文库使用
Guideline for Using in vivo RNAi Libraries of Drosophila
Authors:  郭健严冬 and date: 06/20/2019, view: 8674, Q&A: 0
三、Gal4品系使用 由于所有果蝇RNAi文库都基于UAS载体,它们必须与Gal4品系杂交才能发挥作用。 值得当心的是,将TRiP RNAi品系与w突变体背景的果蝇杂交产生的后代会出现各种眼睛颜色。 在75%的KK品系中,RNAi载体仅插入30B3位点,并且没有问题;在25%的KK品系中,RNAi载体也插入40D3位点,并且与一些Gal4杂交时出现非特异性表型。 清华大学果蝇中心和日本NIG果蝇中心的RNAi品系没有整合到Flybase数据库中,因此需要到相应网站进行搜
果蝇翅成虫盘RNA原位杂交技术
RNA in situ Hybridization in Drosophila Wing Imaginal Discs
Authors:  张延松刘敏, 朱健 and date: 06/20/2019, view: 4929, Q&A: 0
组织原位杂交 准备2.1在PBS缓冲液中解剖果蝇三龄幼虫,暴露翅成虫盘。具体流程请参照“果蝇翅成虫盘免疫荧光染色” (高远等,2019) 中组织解剖部分。将解剖完毕的果蝇组织置于1.5 ml离心管中。 2.24将翅成虫盘置于甘油中制片,具体流程请参照“果蝇翅成虫盘免疫荧光染色” (高远等,2019) 中制片部分。结果与分析原位杂交结果示例 (图1):图1. 原位杂交实验结果. w1118基因型果蝇翅成虫盘使用wg反义荧光探针(A) 和wg正义荧光探针
果蝇幼虫CNS原位杂交实验方案
In situ Hybridization in CNS of Drosophila Larvae
Authors:  李美霞 温省云, 许孟博, 崔名扬, 刘力 and date: 06/20/2019, view: 4151, Q&A: 0
果蝇胚胎原位杂交实验方案. Bio-101 e1010246. 并在玻片上记下探针名称,果蝇品系,封片时间。 ,一般用直径0.5 mm铂金丝制作而成 (普通的不锈钢和铜丝易生锈影响实验,而且这些材料质地不够细密,易粘果蝇的组织)MilliQ纯水仪 (Millipore)水浴锅 (电热恒温水箱) (北京市长风仪器仪表公司 1,000 ml,400 ml,250 ml,200 ml,100 ml,50 ml 细口瓶1,000 ml 称量 20 ml 玻璃棒 蓝口瓶镊子:DUMONT #5一把;DUMONT #55一把样品勺:是
果蝇胚胎原位杂交实验方案
In situ Hybridization in Drosophila Embryos
Authors:  李美霞温省云, 许孟博, 崔名扬, 刘力 and date: 06/20/2019, view: 5045, Q&A: 0
并在玻片上记下探针名称,果蝇品系和封片时间。 10 ml胚胎洗液 (Embryo Wash Buffer) 1 L漂白液 (Bleach Solution) 20 ml二、 胚胎的收集与固定 (Kosman等,2004)胚胎的收集 收集4~5日龄果蝇 用200 μl移液器吸掉杂交液,加入0.4 ml探针液,放入60 °C水浴锅中过夜杂交。注:在步骤15和16中所用杂交液应回收,成为回收杂交液。 用吸管吸掉PTw,加入0.5 ml已预热的杂交液,放入60 °C水浴锅中10
果蝇成蝇脑原位杂交实验方案
In situ Hybridization in Adult Drosophila Brain
Authors:  李美霞温省云, 许孟博, 崔名扬, 刘力 and date: 06/20/2019, view: 3838, Q&A: 0
果蝇胚胎原位杂交实验方案. Bio-101 e1010246. 并在玻片上记下探针名称,果蝇品系,封片时间。 ,一般用直径0.5 mm铂金丝制作而成 (普通的不锈钢和铜丝易生锈影响实验,而且这些材料质地不够细密,易粘果蝇的组织)MilliQ纯水仪 (Millipore)水浴锅 (电热恒温水箱) (北京市长风仪器仪表公司 1,000 ml,400 ml,250 ml,200 ml,100 ml,50 ml 细口瓶1,000 ml 称量瓶20 ml 玻璃棒 蓝口瓶镊子:DUMONT #5一把;DUMONT #55一把样品勺:是