Improve Research Reproducibility
A Bio-protocol resource
实验方法
研究领域
癌症生物学 (445)
发育生物学 (336)
分子生物学 (1184)
干细胞 (262)
免疫学 (615)
神经科学 (731)
生物化学 (1428)
生物物理学 (178)
微生物学 (1183)
系统生物学 (354)
细胞生物学 (2218)
植物科学 (1089)
Bio-protocol
期刊
Bio-101 实验手册
课题组实验方法合辑
Request a Protocol
作者指南
关于
提交实验方法
订阅
A high-quality database for basic life science protocols
实验方法
研究领域
癌症生物学 (445)
发育生物学 (336)
分子生物学 (1184)
干细胞 (262)
免疫学 (615)
神经科学 (731)
生物化学 (1428)
生物物理学 (178)
微生物学 (1183)
系统生物学 (354)
细胞生物学 (2218)
植物科学 (1089)
Bio-protocol 期刊
Bio-101 实验手册
课题组实验方法合辑
Request a Protocol
订阅
提交
提交实验方法
作者指南
关于
Peer-reviewed
Preprint
Extracted from published research articles
生物化学
生物信息学与计算生物学
生物物理学
癌症生物学
细胞生物学
发育生物学
免疫学
微生物学
分子生物学
神经科学
植物科学
干细胞
系统生物学
研究物种
节肢动物
鱼类
真菌
无脊椎动物
哺乳纲
其它脊椎动物
植物
原核生物
原生动物
病毒
蠕虫
相关性
日期
浏览量
实验用果蝇的饲养及管理
Guidance for
Drosophila
Culture and Management
Authors:
王霞
沈达
,
乔欢欢
,
孙锦
,
徐荣刚
,
刘清飞
,
倪建泉
and
date:
06/20/2019,
view:
20587,
Q&A:
2
使用
果蝇
管
杂交
时,每管可放雌雄
果蝇
各5~8只;使用
果蝇
瓶
杂交
时,每瓶可放雌雄
果蝇
各15~20只。若
果蝇
繁殖力较弱,可适当增加初始
果蝇
数量。4)
杂交
果蝇
需准确标记雌、雄亲代的基因型,以及
杂交
时间。 5)进行复杂的
杂交
实验时 (如基因型整合),所需表型的
果蝇
往往只占子代总数的小部分,并且可能由于携带多种基因突变、转基因和平衡子等,生活力和繁殖力较弱;故在
杂交
果蝇组织荧光原位杂交
Fluorescence
in Situ
Hybridization of
Drosophila
Tissues
Author:
刘冀珑
date:
06/20/2019,
view:
6154,
Q&A:
0
三、
果蝇
组织即速荧光原位
杂交
在Grace’s Insect Medium中解剖
果蝇
(解剖方法参见:吴铮和刘冀珑 [2019];Tastan和Liu [2015])。 使用移液器把
杂交
后的组织和15 μl左右的
杂交
混合液转移至盖玻片上。如果组织太大,需要把移液枪头末端用锋利的刀片切去末端,使得开口足够大。将载玻片轻轻压在盖玻片上,注意同时接触到盖玻片四角的凡士林。 将样品放入
杂交
混合液,储存在-20 °C原位混合液中 (样品可储存数月至数年),或执行第5步。
果蝇
组织免
果蝇体内RNAi文库使用
Guideline for Using
in vivo
RNAi Libraries of
Drosophila
Authors:
郭健
严冬
and
date:
06/20/2019,
view:
8674,
Q&A:
0
三、Gal4品系使用 由于所有
果蝇
RNAi文库都基于UAS载体,它们必须与Gal4品系
杂交
才能发挥作用。 值得当心的是,将TRiP RNAi品系与w突变体背景的
果蝇
杂交
产生的后代会出现各种眼睛颜色。 在75%的KK品系中,RNAi载体仅插入30B3位点,并且没有问题;在25%的KK品系中,RNAi载体也插入40D3位点,并且与一些Gal4
杂交
时出现非特异性表型。 清华大学
果蝇
中心和日本NIG
果蝇
中心的RNAi品系没有整合到Flybase数据库中,因此需要到相应网站进行搜
果蝇翅成虫盘RNA原位杂交技术
RNA
in situ
Hybridization in
Drosophila
Wing Imaginal Discs
Authors:
张延松
刘敏
,
朱健
and
date:
06/20/2019,
view:
4929,
Q&A:
0
组织原位
杂交
准备2.1在PBS缓冲液中解剖
果蝇
三龄幼虫,暴露翅成虫盘。具体流程请参照“
果蝇
翅成虫盘免疫荧光染色” (高远等,2019) 中组织解剖部分。将解剖完毕的
果蝇
组织置于1.5 ml离心管中。 2.24将翅成虫盘置于甘油中制片,具体流程请参照“
果蝇
翅成虫盘免疫荧光染色” (高远等,2019) 中制片部分。结果与分析原位
杂交
结果示例 (图1):图1. 原位
杂交
实验结果. w1118基因型
果蝇
翅成虫盘使用wg反义荧光探针(A) 和wg正义荧光探针
果蝇幼虫CNS原位杂交实验方案
In situ
Hybridization in CNS of
Drosophila
Larvae
Authors:
李美霞
温省云
,
许孟博
,
崔名扬
,
刘力
and
date:
06/20/2019,
view:
4151,
Q&A:
0
果蝇
胚胎原位
杂交
实验方案. Bio-101 e1010246. 并在玻片上记下探针名称,
果蝇
品系,封片时间。 ,一般用直径0.5 mm铂金丝制作而成 (普通的不锈钢和铜丝易生锈影响实验,而且这些材料质地不够细密,易粘
果蝇
的组织)MilliQ纯水仪 (Millipore)水浴锅 (电热恒温水箱) (北京市长风仪器仪表公司 1,000 ml,400 ml,250 ml,200 ml,100 ml,50 ml 细口瓶1,000 ml 称量 20 ml 玻璃棒 蓝口瓶镊子:DUMONT #5一把;DUMONT #55一把样品勺:是
果蝇胚胎原位杂交实验方案
In situ
Hybridization in
Drosophila
Embryos
Authors:
李美霞
温省云
,
许孟博
,
崔名扬
,
刘力
and
date:
06/20/2019,
view:
5045,
Q&A:
0
并在玻片上记下探针名称,
果蝇
品系和封片时间。 10 ml胚胎洗液 (Embryo Wash Buffer) 1 L漂白液 (Bleach Solution) 20 ml二、 胚胎的收集与固定 (Kosman等,2004)胚胎的收集 收集4~5日龄
果蝇
用200 μl移液器吸掉
杂交
液,加入0.4 ml探针液,放入60 °C水浴锅中过夜
杂交
。注:在步骤15和16中所用
杂交
液应回收,成为回收
杂交
液。 用吸管吸掉PTw,加入0.5 ml已预热的
杂交
液,放入60 °C水浴锅中10
果蝇成蝇脑原位杂交实验方案
In situ
Hybridization in Adult
Drosophila
Brain
Authors:
李美霞
温省云
,
许孟博
,
崔名扬
,
刘力
and
date:
06/20/2019,
view:
3838,
Q&A:
0
果蝇
胚胎原位
杂交
实验方案. Bio-101 e1010246. 并在玻片上记下探针名称,
果蝇
品系,封片时间。 ,一般用直径0.5 mm铂金丝制作而成 (普通的不锈钢和铜丝易生锈影响实验,而且这些材料质地不够细密,易粘
果蝇
的组织)MilliQ纯水仪 (Millipore)水浴锅 (电热恒温水箱) (北京市长风仪器仪表公司 1,000 ml,400 ml,250 ml,200 ml,100 ml,50 ml 细口瓶1,000 ml 称量瓶20 ml 玻璃棒 蓝口瓶镊子:DUMONT #5一把;DUMONT #55一把样品勺:是