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农杆菌感受态制备及转化
Preparation and Transformation of Agrobacterium Competent Cells
Authors:  徐远涛徐强 and date: 07/10/2018, view: 16340, Q&A: 2
农杆菌热激转化2.1取5 μl pK7WG2D_Cs7g29500-ox终载体质粒 (约1-2 μg) 加入到100 μl农杆菌感受态细胞中混匀。 常用农杆菌菌株主要有两种：GV3101 (多用于转化拟南芥和烟草)、EHA105 (多用于转化柑橘和愈伤组织)。
反刍动物消化道微生物CAZymes基因资源的挖掘与功能分析
Mining and Functional Characterization of CAZymes Derived from Gastrointestinal Microbiota in Ruminants
Authors:  王谦王佳堃, 孙小宝, 曹佳雯 and date: 03/25/2021, view: 3019, Q&A: 0
... 热激转化3.1将上述的连接产物与100 μl大肠杆菌BL21感受态细胞混合，轻弹管壁，使样品混匀，冰浴30 min。3.242 °C下热激60 s，立即冰浴5 min。 3.45000 × g 离心2 min，弃上清，剩余100 μl LB悬菌，将所有转化后的细菌液涂于含有50 μg/ml Kan LB平板上，在37 °C下培养12~16 h后，观察平板上的细菌密度。 为模板，逆转录合成cDNA，反应体系与条件如下：Random Primer (25 pmol/μl)1 μl总R
PCR扩增及克隆基因
PCR Amplification and Gene Cloning
Authors:  徐远涛徐强 and date: 06/12/2018, view: 14878, Q&A: 0
... 6.4将孵育后的感受态细胞放入42 °C水浴锅中热激90 s，迅速取出放冰上静置2 min。 6.5热激后的感受态细胞中加入400 μl液体LB培养基，37 °C恒温摇床上220 rpm转速培养活化1 h。 转化感受态细胞：6.1开启超净工作台风机，紫外灯灭菌15 min。 大肠杆菌转化过程均应在超净工作台操作，所用的离心管、枪头、培养基均需要121 °C、15 min灭菌。
菌酶一体化重组酵母工程菌的设计与构建
Design and Construction of Recombinant Yeast with Surface-displayed Enzymes
Authors:  王谦王佳堃, 高德英 and date: 02/25/2021, view: 3079, Q&A: 0
... 4.2将离心管置于42 °C水浴热激60 s，立即取出冰浴2~3 min。 42 °C水浴中热激15 min。4 °C，13,000 g，离心1 min，去上清。每管加入1 ml YPD液体培养基，30 °C保温2 h。 4.3吸取100 μl已转化后的细胞，涂布于具有抗性筛选的LB固体培养基中。 取转化产物100 μl涂布于含亮氨酸的YNB固体缺陷培养基上，待液体被吸收将平板倒置，30 °C培养2~3 d。 同源重组体系重组质粒的转化4.1将10 μl连接产物