柑橘原生质体融合-电融合
Citrus Protoplast Electrofusion
Authors: 刘丹肖诗鑫,
邓秀新 ,
郭文武 and
date: 06/12/2018,
view: 5389,
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去除上清液，加入适量的电融合液吸打混匀，在倒置显微镜下用血细胞计数板统计原生质体数目，然后用电融合液调整愈伤和叶肉原生质体的密度。 原生质体融合-电融合法5.1将双亲原生质体用电融合液重悬，混合均匀 (胚性愈伤组织原生质体1 x 106 个/ml；叶肉原生质体2 x 106个/ml)。 5.2融合小池先用电融合液洗涤，以防原生质体聚集于电极两侧的角落里，然后取0.8 ml (FTC-03) 或1.6 ml (FTC-04) 原生质体混合液于环形融合小槽，融合小池中央加2滴电融合液用来保持
犬体细胞克隆
Canine Somatic Cell Nuclear Transfer
Authors: 王晓民赖良学 and
date: 12/20/2022,
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... ，再移入电融合液中；调节好电融合参数（电压：4 kV/cm；时间：10 μs；脉冲数：2次），进行电融合；融合后的胚胎用胚胎培养液清洗3遍，转入胚胎培养基中，放入培养箱30 min；电融合后的胚胎再进行化学激活 失败经验细胞融合过程中需要将胚胎摆好，让体细胞的位置与电流方向垂直；细胞电融合过程中可以适当提高电压或是换用点状电极。 仪器设备倒置显微镜（Olympus-IX73）显微操作系统（TransferMan 4r）CO2培养箱（Thermo-4111）生物安全柜（ESCO-AC2-6S1）体视
PEG法介导的柑橘原生质体转化
PEG-mediated Citrus Protoplast Transformation
Authors: 杨雯惠 刘丹 ,
郭文武 and
date: 06/12/2018,
view: 11863,
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... 材料与试剂注：本实验中叶片及愈伤的准备，原生质体的分离、纯化、活体检查操作步骤所需试剂见柑橘原生质体融合-电融合 (刘丹等，2018)。 4.15将皿放回在28 ± 2 °C的避光培养箱中培养 (培养步骤详见柑橘原生质体融合-电融合 [刘丹等，2018])。 见溶液配方)40% (w/v) 聚乙二醇 (PEG) 工作溶液 (见溶液配方)洗脱溶液 (见溶液配方)仪器设备注：本实验中叶片及愈伤的准备，原生质体的分离、纯化、活体检查操作步骤所需设备见柑橘原生质体融合-电融合 移液枪摇床离心机CompactPrep Midi色谱柱倒置荧光显
猪体细胞核移植
Porcine Somatic Nuclear Transfer
Authors: 樊娜娜欧阳振,
王教伟,
赵宇,
赖良学 and
date: 11/20/2022,
view: 2531,
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... 采用的是电融合法进行核转移重构胚胎无需再进一步激活；而如果采用直接注射的方法，需要对重构胚进行激活处理，如果采用电激活，只需要将重构胚采用与电融合相同的参数进行电脉冲刺激即可。 猪卵母细胞的激活可以采用多种物理的或化学激活实现，以下介绍两种常用的方法：电激活
成熟的猪卵母细胞很容易被电刺激激活，电融合的同时就可以实现重构胚胎的激活。 调整电融合仪参数：2次120KV/cm，30微秒直流电脉冲，间隔1秒；待融合的卵母细胞-体细胞对在融合液中洗3遍后置于覆盖融合液的融合电极之间，用玻璃微针拨动使得卵母细胞-体细胞接触面