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瘤胃微生物移植
Rumen Microbiota Transplantation
Authors:  王佳堃杨斌, 俞少博 and date: 12/25/2020, view: 5169, Q&A: 0
口腔采集瘤胃液 1.3瘤胃液移植到受体动物 受体动物在瘤胃液移植前1~2周停止使用抗生素。将瘤胃插管经受体动物口腔插入瘤胃中。 1.2供体瘤胃液的采集 于瘤胃液移植当天晨饲前,使用瘤胃采集管通过口腔采集供体动物的瘤胃液 (视频1)。弃去前100 ml瘤胃液 (防止唾液污染),随后收集的瘤胃液于密封保温瓶中暂存。 用注射器将瘤胃液经瘤胃插管注入。从瘤胃
反刍动物瘤胃原虫与细菌微循环测定方法
Determination of Ruminal Protozoa and Bacteria Recycling
Authors:  王梦芝甄永康, 高健, 王洪荣 and date: 04/22/2021, view: 2199, Q&A: 0
用时解冻荧光标记细菌,使用高速离心机于22,000 × g离心15 min (25 °C),收 集沉淀,使用无菌瘤胃液悬浸制成2倍浓度的荧光标记瘤胃细菌 (FLRB) 悬液, 置水浴锅 (39 °C) 体外法研究不同油脂对瘤胃原虫吞噬细菌微循环的影响. 中国农业科学 43(18): 3831-3837. 王梦芝. (2008). 山羊瘤胃原虫与细菌吞噬关系和微生物AA变化机制的研究. 溶液配方无菌瘤胃液 采集瘤胃液,于29,000 × g离心20 min (25°C),取上清液,使用高压
反刍动物瘤胃样品采集与保存
Collection and Preservation of Ruminant Microbial Samples
Authors:  张小丽王祚, 周传社, 焦金真, 谭支良 and date: 07/07/2021, view: 4472, Q&A: 0
瘤胃液采集管. 瘤胃示意图. 同时为避免最初采集的瘤胃液中包含口腔唾液,食管中的消化道黏膜分泌物以及残留在采集管内的蒸馏水,丢弃最初收集的100 ml瘤胃液,随后抽取的瘤胃液才作为后续试验的样品。 待采集管到达瘤胃腹囊后将大容量注射器 (100 - 200 ml) 与采样管后方连接好,抽动大容量注射器即可抽取瘤胃内容物。 背冠状沟3.瘤胃背囊4.右纵沟5.脾6.食管7.网胃8.瓣胃9.皱胃10.十二指肠11.瘤胃腹囊12.腹冠状沟13
瘤胃甲烷菌的分离培养与保存
Isolation and Preservation of Rumen Methanogens
Authors:  金巍成艳芬, 毛胜勇, 朱伟云 and date: 04/23/2021, view: 2608, Q&A: 0
材料与试剂二甲亚砜甘油甲醇一甲胺盐酸盐二甲胺盐酸盐三甲胺盐酸盐高纯氢气高纯氮气高纯二氧化碳新鲜瘤胃内容物无细胞瘤胃液 (将新鲜瘤胃液10,000 × g,4 °C离心15 min,取上清)酵母膏胰蛋白胨碳酸氢钠刃天青辅酶 在通二氧化碳的条件下(或者在厌氧手套箱中操作),取5 ml瘤胃内容物匀浆液,加入到含有45 ml培养基的血清瓶中,手摇混合均匀(10倍稀释)。 菌的分离: 通过充二氧化碳对500 ml高压瓶除氧,取约50 g瘤胃内容物快速放入瓶中,再加入150 ml已预热的培养基,盖上瓶盖,用手用力摇晃
瘤胃厌氧真菌的分离培养与保存
Isolation and Preservation of Anaerobic Fungi from the Rumen
Authors:  徐尧成艳芬, 朱伟云 and date: 04/13/2021, view: 3026, Q&A: 0
无细胞瘤胃液 采集新鲜的山羊瘤胃内容物,经四层纱布初步过滤,滤液带回实验室进行高速离心(10000 × g,20 min,4 °C),取上层清澈的无细胞瘤胃液,于-20 °C冰箱中保存备用。 规格:ICCS无限远复消色差及反差增强型光学系统,总放大倍率12.5~20,000X,激光405 nm波长,横向分辨率120 nm)实验步骤一、 厌氧真菌的富集培养利用负压装置从装有永久瘘管的反刍动物瘤胃中采集瘤胃内容物 取5 ml瘤胃内容物,接入已预热至39 °C,并含有氯霉素溶液的45 ml复合
瘤胃厌氧真菌代谢产物的检测方法
Measurement of the Metabolites of Rumen Anaerobic Fungi
Authors:  李与琦成艳芬, 朱伟云 and date: 04/23/2021, view: 1911, Q&A: 0
参考文献李袁飞,孙美洲,成艳芬,朱伟云. (2017) 高效液相色谱法研究瘤胃甲烷菌共存对厌氧真菌代谢产生有机酸特性的影响. 动物营养学报, 29(04):1198-1204. 用于测定甲酸、乳酸、乙酸、柠檬酸和琥珀酸的样品前处理 瘤胃体外发酵结束后,从血清瓶内取出0.6 ml发酵上清液,加入25% 偏磷酸 120 μl,-20 °C冰箱过夜,解冻后,4 °C条件下15984 二氧化碳百分比计算公式:y1 = (0.1641 × 峰面积 - 53.387) /100 二氧化碳产量计算公式:y2 = y1 × 瘤胃体外发酵过程中的产气量 根
反刍动物瘤胃原虫的分离培养与形态学分析
Separation and Morphological Analysis of Protozoa from Rumen Contents
Authors:  高健甄永康, 王梦芝, 王洪荣 and date: 04/27/2021, view: 2964, Q&A: 0
过滤的瘤胃液放入到厌氧工作站中,使用无氧稀释液依次进行十倍梯度稀释 (10-2、10-3或其他倍数,以每个计数格6-8只原虫为准),稀释后的瘤胃液放置于厌氧工作站中39 °C保存。 体外法研究不同油脂对瘤胃原虫吞噬细菌微循环的影响. 中国农业科学 43(18): 3831-3837. 王梦芝. (2008). 山羊瘤胃原虫与细菌吞噬关系和微生物AA变化机制的研究. 见溶液配方)培养液M (见溶液配方)培养液SP (见溶液配方)底物悬液 (见溶液配方)仪器设备 40目筛 解剖显微镜 恒温水浴锅 厌氧工作站 离心机实验步骤 晨
反刍动物瘤胃原虫样品采集及计数方法
Methods of Sampling and Counting of Ruminal Protozoa
Authors:  甄永康高健, 王梦芝, 王洪荣 and date: 04/13/2021, view: 2781, Q&A: 0
体外法研究不同油脂对瘤胃原虫吞噬细菌微循环的影响. 中国农业科学, 43(18): 3831-3837.王梦芝. 山羊瘤胃原虫与细菌吞噬关系和微生物AA变化机制的研究[D]. XB.K.25.)胶头滴管NaCl甲醛溶液甲基绿35%甲醛溶液 (见溶液配方)MFS染色液 (见溶液配方)仪器设备光学显微镜 (奥林巴斯CKX41,日本)实验步骤采用负压装置在晨饲前从装有永久瘘管的反刍动物瘤胃中采集瘤胃液 将1 ml瘤胃液加入2 ml MFS染色液中混匀,摇匀,4 °C保存备用。 用荧光标记法研究瘤胃
瘤胃体外发酵过程中产气量与甲烷产量的检测
Determination of Gas and Methane Production in In vitro Ruminal Fermentation
Authors:  李与琦成艳芬, 朱伟云 and date: 04/23/2021, view: 2950, Q&A: 0
瘤胃微生物在降解底物的过程中产气,在发酵过程中检测发酵瓶中的产气量并分析气体成分,可以从产气角度评价瘤胃发酵效果。压力传感器广泛应用于瘤胃体外发酵中的产气检测过程,该仪器能检测到环境中的压力变化。 ,评价瘤胃微生物对不同饲料的降解效果。 本实验方案适用于厌氧发酵,在添加培养基的厌氧密闭发酵瓶中接种瘤胃微生物以及发酵底物,随后将发酵瓶放入39 °C恒温培养箱中模拟瘤胃环境进行发酵。 将已经接种瘤胃微生物以及发酵底物的厌氧密闭发酵瓶从39 °C非厌氧恒温培养箱中取出,测定时
瘤胃混合细菌连续传代培养技术
Sequentially Transfer Ruminal Bacterial Cultures Technology in vitro
Authors:  封丽梅胡光辉, 晏琦, 林淼 and date: 04/23/2021, view: 2448, Q&A: 0
瘤胃液来自带有永久性瘤胃瘘管的牛或羊,经4层无菌纱布过滤后,将容器灌满,立刻于39 °C水浴并迅速带回实验室。每瓶加入2 ml瘤胃液,胶塞密封加铝盖后,测初始气压值。将培养瓶于39 °C静置培养。 实验使用150 ml体积的厌氧培养瓶为培养装置,采集牛/羊瘤胃液 (瘤胃液采集时间可根据试验目的来确定) 前用小药勺称取发酵底物于干燥培养瓶中。为了保证测试样品具有代表性,每个样品至少做6个平行测定。 乙醇对瘤胃液接种稻秸的体外发酵产物及细菌群落结构的影响. 生物技术通报 36(2): 91-