• Peer-reviewed
  • Preprint
  • Extracted from published research articles
  • 生物化学
  • 生物信息学与计算生物学
  • 生物物理学
  • 癌症生物学
  • 细胞生物学
  • 发育生物学
  • 免疫学
  • 微生物学
  • 分子生物学
  • 神经科学
  • 植物科学
  • 干细胞
  • 系统生物学
  • 相关性
  • 日期
  • 浏览量
高通量siRNA文库筛选体系的建立及优化
High-Throughput siRNA Library Screening Assay Development and Optimization
Author:  韩帅date: 10/22/2021, view: 3913, Q&A: 0
二、建立siRNA筛选检测体系需要考虑的重点因素siRNA筛选体系建立的目标及指导原则 所有高通量筛选项目在体系建立及优化阶段基本都围绕共同的目标，即筛选体系的特异性、灵敏性及稳定性。 在开始正式筛选之前，每个项目都经过了筛选体系的建立及优化。本文将重点介绍siRNA筛选体系建立
siRNA文库筛选细胞活力调控因子---CellTiter-Glo法
siRNA Library Screening of Regulatory Factors of Cell Viability—CellTiter-Glo Luminescent Cell Viability Assay
Authors:  陈敏骆大葵, 韩帅, 李心翔, 高大明 and date: 06/01/2021, view: 3222, Q&A: 0
筛选体系建立及优化 为建立最优的筛选实验体系，我们测试并优化了多种实验条件，主要包括：细胞接种密度、CTG检测阈值、CTG用量、siRNA转染试剂及用量。 筛选出候选基因后，后续再用其他实验辅助验证。 正式筛选实验时，每块siRNA板子都需要设置阴性和阳性对照，数据处理时都是跟同一块板的阴性对照NC比较。 运用96孔板进行筛选实验，液体体积在150-200 μl均可。由于ATP易水解，加入CTG试剂的整个检测实验操作过程中应该特别注意
利用SPR技术高通量筛选蛋白互作活性小分子
High-Throughput Screening for Small Molecules Interacting with Targeted Protein by SPR Technology
Authors:  刘伟谢华彬, 王烁英, 慈云青, 许超, 兰姝珏, 陈铭 and date: 03/06/2025, view: 1828, Q&A: 0
（德国Nano Temper公司）离心机Centrifuge 5810R（德国Eppendorf公司）微孔板振荡器ORBITAL SHAKER MX100-4A（CHINCAN公司）实验步骤一、高通量筛选体系的建立和筛选实施高通量筛选总流程 本案例中高通量筛选实验设计、系统建立以及筛选实施均由中国科学院分子细胞科学卓越创新中心化学生物学技术平台完成。感谢化学平台各位老师在项目实施过程中所提供的帮助。参考文献李杰. (2022). 相比其它分子互作
荧光偏振技术在β-catenin/LEF1相互作用小分子抑制剂高通量筛选中的应用
Application of A Fluorescence Polarization Screening Assay for the Discovery of β-catenin/LEF1 Interaction Antagonists
Authors:  闫干干戚海燕, 付正豪, 陈云雨 and date: 06/24/2021, view: 3891, Q&A: 0
荧光偏振筛选模型Z′因子值的确定苗头化合物的筛选 应用上述已建立的荧光偏振高通量筛选模型，对本室天然产物化合物库进行了高通量筛选，成功筛选到血根碱 (sanguinarine, SAN) 和白屈菜红碱 溶液配方重组人β-catenin 重组人β-catenin由大肠杆菌原核表达，经分离纯化后制备，用于荧光偏振筛选模型的建立。 β-catenin最佳工作浓度确定是高通量筛选模型建立的关键要素。通常认为参与反应的β-ca
hcGAS特异性小分子抑制剂体外高通量筛选
High-throughput Screening of Human cGAS Specific Small Molecule Inhibitors in Vitro
Authors:  侯燕飞杨银龙, 张从刚 and date: 10/22/2021, view: 1910, Q&A: 0
同时，我们提纯了Luciferase蛋白并建立了ATP-LUM检测体系 (Nakatsu et al., 2006),为体外高通量筛选的检测提供了便捷的实验方法。 二、cGAMP合成体系与ATP-LUM检测体系的建立在反应缓冲液中加入hcGAS、HT-DNA (一种双链DNA)、ATP和GTP，使其终浓度分别为100 nM、25 nM、100 μM和100 μM， 2019)，前期cGAMP体外实验的成功合成，为后期体外高通量筛选反应体系提供了实验基础
AFLP基因组捕获技术: 一种通用的低阶元的系统发育分析方法
AFLP Genome Capture Technique: A General Method for Shallow Scale Phylogenetic Analysis
Authors:  李佳璇梁丹, 张鹏 and date: 02/10/2021, view: 3345, Q&A: 0
... 接头连接和片段筛选 (耗时：约1.5 h)2.1在新的0.2 ml离心管中，按下表建立接头连接反应体系 (表2)。表2. 1.2按下表建立酶切反应体系 (表1)。表1. 酶切反应体系1.3将配制好的酶切反应体系充分涡旋混匀，简短离心，37 °C孵育20 min。 1.3在新的0.2 ml离心管中，按下表建立探针文库混合体系 (表10)。表10. 1.2按下表建立片段化反应体系 (表8)。表8
基于表面等离子共振技术构建色氨酰tRNA合成酶的抑制剂筛选和验证体系
Establishment of Inhibitor Screening and Validation System for Tryptophanyl tRNA Synthetase Using Surface Plasmon Resonance
Authors:  王倩朱贵旺, 刘振明 and date: 11/08/2024, view: 777, Q&A: 0
六、SA芯片固定His-avitag (biotin)-TrpRS，构建TrpRS与吲哚霉素在HBS-P缓冲溶液条件下的高通量筛选体系 为了测试TrpRS SPR分析系统在高通量筛选中的可行性和重复性， 数据的导出 实验注意要点成功经验 （1）标签和固定方式的优化：本次研究通过多次实验优化了TrpRS的标签和芯片固定方式，使SPR体系在高通量筛选中的适应性和灵敏度显著提高，Z因子数值稳定在0.9以上。 实验条件中，对TrpRS的亲和力结果图六、SA芯片固定His-avitag (biotin)-TrpRS
混合分子标记扩增子高通量测序方案
A Mixed Molecular Marker Amplicon Sequencing Scheme Based on High Throughput Sequencing Platform
Authors:  李佳璇张圆, 梁丹, 张鹏 and date: 01/25/2021, view: 5212, Q&A: 0
... 第一轮PCR: 按下表建立20 μl的反应体系:PCR反应程序: 第二轮PCR: 按下表建立20 μl的反应体系:PCR反应程序: 使用1.2 %的琼脂糖凝胶电泳检测二轮PCR扩增产物 (如图2b)。 按下表建立片段化反应体系: 注: 建议片段化体系的准备工作在冰上完成。将配制好的酶切反应体系充分振荡混匀，离心，放入PCR仪中，37°C孵育10-25 min。 2)按下表建立平末端加A尾的反应体系:3)充分振
酶联免疫吸附实验在β-catenin/TCF4相互作用小分子抑制剂高通量筛选中的应用
Application of An Enzyme-linked Immunosorbent Assay for the Screening of Small-molecule Inhibitors Targeting β-catenin/TCF4 Interaction
Authors:  付正豪戚海燕, 闫干干, 刘晓平, 陈云雨 and date: 07/07/2021, view: 1793, Q&A: 0
DMSO浓度对GST-TCF4 βBD/β-catenin结合反应的影响ELISA筛选模型Z′因子值的确定 建立的ELISA筛选模型的Z′因子值为0.83，满足了高通量筛选中Z′因子值大于0.5 的基本要求 基于β-catenin/Lef1相互作用为靶标的新型抗肿瘤药物高通量筛选模型的建立. normal;">生物工程学报, 35(4): 707-717. 将GST-TCF4 βBD (2 μg/ml) 以100 μl/孔包被于96孔酶标板中，以100 μl/孔加入0.5