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斑马鱼的自然交配产卵及胚胎培养技术
Natural Breeding and Embryo Culture of Zebrafish
Authors:  柳力月李玲璐, 潘鲁湲, 李阔宇, 孙永华 and date: 03/08/2022, view: 13915, Q&A: 1
为发生过假性分裂的未受精鱼卵.失败经验自然交配后,斑马鱼不产卵、产卵量少可能有以下几方面原因:产卵用雌雄斑马鱼未性成熟。正常养殖情况下,斑马鱼3个月左右性成熟。 自然交配与鱼卵收集次日早上按照鱼房正常光周期给予光照,并给配种缸内斑马鱼换水。明周期开始后的半小时内,雌雄鱼会出现明显的相互吸引行为,频繁接近隔板,在隔板附近区域游动。 下文将详细介绍实验室内斑马鱼的自然繁育过程。实验前准备为提高斑马鱼的产卵量,应在交配前1至2周对雌雄成鱼增添活饵料投喂。长期规律地用于产卵的成鱼应坚持每日2次以
长爪沙鼠胚胎移植
Embryo Transfer in Mongolian Gerbils
Authors:  郭萌王妍, 李长龙, 杜小燕, 陈振文 and date: 08/13/2021, view: 1299, Q&A: 0
... (3)将胚胎吸入移卵管:在10 cm细胞培养皿中滴加几滴预热的M2培养基,用口吸管吸出20~22枚存活的培养0.5 dpc的胚胎(如图2所示,一般移植20~22枚卵可产子7个左右,接近于沙鼠自然交配产仔数 与输精管结扎的雄性沙鼠合笼,因沙鼠阴道栓极易脱落,应在含有托盘(图1)的笼内交配,通过观察托盘内是否有掉落的阴道栓判断交配是否成功。阴道栓检测阳性即可确认作为假孕受体沙鼠即假孕0.5天。图 1.
斑马鱼精子冻存
Sperm Cryopreservation in Zebrafish
Authors:  谢训卫李玲璐, 罗姣, 潘鲁湲, 孙永华 and date: 03/08/2022, view: 4318, Q&A: 0
... 用于精子样品收集的雄鱼应当与雌鱼有自然交配经历,且交配成功产卵。冻存前一月,用于操作的雄鱼可单独分缸养殖,不再接触雌鱼。养殖密度不宜过高。保证每天至少2次活饵料投喂。 3月龄的斑马鱼雄鱼可以用于自然交配产卵,但是产精体积过少,不适于收集精子样品。18个月龄之后,斑马鱼逐渐进入老年期,精子样品产量和质量都会下降,也不适于收集样品。 长期投喂不足,冻存操作前进行过自然交配,或刚刚接受过剪尾鳍损伤的雄鱼,精子样品的产量和质量都会受到影响,甚至收集不到。斑马鱼精子样品收
小鼠囊胚注射
Mouse Blastocyst Injection
Authors:  唐蔚俞骞, 陈子尘, 李周结, 王倩雯, 丁一夫, 吴宝金 and date: 09/20/2022, view: 3483, Q&A: 0
... 由于自然交配囊胚产量不高,而且胚胎发育可能不同步,通常选择3-4周龄的雌鼠进行超排以便获得足够数量的受精卵。可育雄鼠:选用8周龄以上的同品系雄鼠,最好有过交配记录。 用作胚胎移植受体的假孕母鼠:由6-8周龄自然发情的母鼠与结扎雄鼠交配所成。其性周期与受精卵供应鼠保持一致。
斑马鱼的体外受精
In vitro Fertilization Technology of Zebrafish
Authors:  李玲璐谢训卫, 潘鲁湲, 孙永华 and date: 03/08/2022, view: 6144, Q&A: 0
... 将鱼房中前一天放置的装有雌雄鱼的配种缸拿到实验场所,与自然交配产卵不同,第二天早晨不要抽开隔板,不要让雌鱼接触雄鱼。打开解剖显微镜和鹅颈灯。 挤过的雌、雄鱼,一周后可以用于自然配鱼产卵。
斑马鱼原始生殖细胞移植或替换技术
Primordial Germ Cells Transplantation or Replacement in Zebrafish
Authors:  张峰华潘鲁湲, 王小四, 朱作言, 孙永华 and date: 03/08/2022, view: 5306, Q&A: 0
... 供体胚胎的制备:实验当天早晨,抽去隔板,让前一天配对的斑马鱼自然交配,收集1细胞期斑马鱼胚胎,并将400 ng/μL cas9-UTRnos3 mRNA,80 ng/μL pou5f3 gRNA,200 B. 1号雌鱼与2号雄鱼交配子代从sphere期到24 hpf的表型。