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热泉高温细菌分离培养方法
Methods for Isolation and Cultivation of Thermophiles in Hot Springs
Authors:  鲜文东胡超建, 李文均 and date: 05/11/2021, view: 3514, Q&A: 0
... 样品梯度稀释五、 样品涂布及分离培养： 样品稀释完成后，从每个玻璃试管中吸取100 μl稀释液到培养皿，用涂布棒充分涂匀，涂布过程中平板距离酒精灯火焰3-5 cm, 然后在每个培养皿上做好标签 ，一般需要包含培养基、样点、培养温度、稀释梯度及涂布时间等信息，在超净工作台中正置2 h，使培养基表面的水分充分吸收，最后倒装入保鲜袋中，分别放入45 °C，55 °C，65 °C培养箱置后培养3-7 挑选完成后，在超净工作台中利用接种针
盐湖微生物的分离培养及保藏方法
Isolation and Preservation of Microorganisms in Salty Lake
Authors:  刘永红刘冰冰, 李文均 and date: 04/23/2021, view: 4851, Q&A: 0
... 3.2直接涂布法 将风干样品进行撵磨，选用无菌棉棒蘸取少许样品，采用三线或者四线法接种于分离培养基上。挑选最后一笔的单一菌落进行纯化。 样品稀释及涂布4.1将经过预处理的样品进一步稀释成浓度为10-3或10-4的悬浊液；4.2依次将每个样品，每个浓度下的悬浊液100 μl涂布于分离培养基；4.3涂布后的平板置于黑暗条件下于37 °C倒置培养 平板涂布培养 分别取每个样品稀释至10-3和10-4浓度下的悬浊液
河口水体和沉积物中微生物的分离培养与鉴定
Isolation and Identification of Microorganisms in Estuarine Water Column and Sediments
Authors:  段丽王攀登, 李佳岭, 李文均 and date: 06/11/2021, view: 3263, Q&A: 0
... 样品涂布： 样品稀释完成后，每个离心管中吸取100 μl到培养皿，用涂布棒充分涂匀，直至液体完全消失，然后在每个培养皿上做好标签，一般需要包含培养基简称、样点名、稀释梯度及时间等信息，封口后放入保藏箱28 挑选完成后，在超净工作台中利用接种针挑取单菌落到纯化板上，单板需采用三区划线法，二分板和四分板只需一区即可，但不同菌之间需要保留足够的距离。 水样稀释： 与沉积物样品稀释类似，将样品充分摇匀后梯度稀释至离心管中即可。 纯化培养基配制： 待已
黄翅大白蚁肠道放线菌的分离与培养
Isolation and Cultivation of Actinomycetes from the Gut of Macrotermes Barneyi
Authors:  蒋宇彤未建华, 李净净, 倪金凤 and date: 04/12/2021, view: 2463, Q&A: 0
... 放线菌在黄翅大白蚁肠道不是优势菌，因而在较低的稀释倍数时可以得到较多的放线菌，但同一平板上细菌数目也很多，经多次稀释涂布平板和平板划线后，最后得到 13 株放线菌菌株 (表1) 。 取各个梯度PBS稀释液 (10-1、10-2、10-3、10-4) 150 μl分别涂布于高氏一号培养基中，30 °C培养，每天观察平板上菌落生长情况。 通过稀释涂布和划线的方法，经可溶性淀粉培养基纯化至只有同一种菌落，即得到纯化的克隆。二、 白蚁肠道分离菌株的序列分析将纯化的菌株接
运用可培养组技术开展难培养真菌的分离和鉴定
Applying Culturomics Approach for the Isolation and Identification of Previously Uncultured Fungi
Authors:  周欣李盟, 马紫英, 祁智慧, 黄君恩, 蔡磊 and date: 04/12/2021, view: 3626, Q&A: 0
... （稀释20倍）于每个孔中。 定期转种法和低温冷冻法保藏致病真菌活性的能力比较. 菌物学报, 38: 1379–1384.Berdy, B., Spoering, A. L., Ling, L. 将涂布后的PDA平板置于28 °C温箱内培养4天，然后每隔2天观察并挑取新出现的真菌菌落。将形态和颜色不同的真菌菌落分别转移到新的PDA平板中进行纯化。 在超净工作台中向灭菌后96孔分离装置的每个孔中加入100 μl水琼脂培养基（20 g琼脂，灭菌蒸馏水，35 g 海盐，氨苄青霉素50 μg/ml，链霉素50 μg/ml，定
水稻白叶枯病菌及细菌性条斑病菌培养及接种
Cultivation of Xanthomonas oryzae pv. oryzae, Xoo and Inuculation of Rice
Authors:  马海港袁猛 and date: 03/15/2018, view: 15171, Q&A: 1
... 三、水稻白叶枯病菌的接种及调查方法 菌体于28 °C温箱内培养2天长成亮黄色后，用PBS溶液稀释，采用比浊法将浓度稀释至约9 x 109个细菌/ml。 四、水稻细菌性条斑病菌的接种及调查方法 细菌的培养及稀释同白叶枯病菌。接种采用渗透法(视频1)或针刺法(视频2)，于水稻幼苗期或孕穗期接种。 见溶液配方)仪器设备-70 °C冰箱超净工作台接种环温箱实验步骤一、水稻白叶枯病菌及细菌性条斑病菌的培养 取出于-70 °C保存的菌株，于超净工作台上用灭菌枪头吸取菌液至土豆斜面培养基上，用
树木共生真菌菌株纯化及快速鉴定方法
Method for Purification and Rapid Identification of Tree Associated Symbiotic of Fungi
Authors:  韦焕深袁志林 and date: 05/11/2021, view: 3738, Q&A: 0
... )，稀释10倍或100倍等；吸100 μl稀释后悬浮液至新鲜的PDA平板上，使用涂布棒均匀涂布，25 °C黑暗培养，每个样品重复三个平板；24 h后开始观察，之后间隔3-5 h观察一次，发现单根菌丝后转移至新鲜平板上 10倍；转移稀释后取100 μl悬浮液至新鲜的PDA平板上，使用涂布棒均匀涂布，25 °C黑暗培养，每个样品梯度重复三个平板；24 h (根据真菌本身生长速度，可调整) 后开始观察，之后间隔3-5 h观察一次 Species Recognition
菌酶一体化重组酵母工程菌的设计与构建
Design and Construction of Recombinant Yeast with Surface-displayed Enzymes
Authors:  王谦王佳堃, 高德英 and date: 02/25/2021, view: 3084, Q&A: 0
... 4.3吸取100 μl已转化后的细胞，涂布于具有抗性筛选的LB固体培养基中。 三、 LiAc转化法向50 μl酵母感受态细胞中加入5 μl重组质粒 (1~1.5 μg) 混合均匀，30 °C保温30 min，每间隔10 min混匀一次。 取转化产物100 μl涂布于含亮氨酸的YNB固体缺陷培养基上，待液体被吸收将平板倒置，30 °C培养2~3 d。 免疫荧光分析 将诱导后新鲜的酵母细胞 (EBY100/orf6-un) 稀释至OD600 = 0.5，设置EBY100为阴性对照。 取300 μl稀释
黄翅大白蚁后肠几丁质降解微生物的分离与培养
Isolation and Cultivation of Chitin-degrading Microorganisms from the Hindgut of Macrotermes barneyi
Authors:  张硕蒋宇彤, 孙新新, 倪金凤 and date: 04/13/2021, view: 2476, Q&A: 1
... 取各个梯度PBS稀释液 (10-1、10-2、10-3、10-4 和10-5) 200 μl分别涂布于几丁质培养基平板上，在有氧和厌氧两种条件下30 °C培养5 d。 利用基因组试剂盒提取菌株的基因组DNA，用分光光度计检测DNA纯度，用琼脂糖电泳法检测DNA浓度。 测序结果在NCBI系统中进行Blast比对，下载相似性最高的相关细菌菌株序列，利用MAGE7.0 软件邻位法构建系统发育树，确定分离菌株的分类地位。 结果与分析一、分离到8株几丁质降解菌