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细胞RNA Pulldown实验——利用体外合成带生物素标记的RNA检测细胞裂解液中与目标RNA互作的蛋白的方法
RNA Pulldown Assay
Authors:
桑凌杰
瞿蕾
,
陈怡君
,
林爱福
and
date:
09/15/2022,
view:
2074,
Q&A:
0
RNA
-
蛋白
孵育:5.1取预清洗好的包含有1mg
蛋白
的细胞裂解液各1 mg于两个新1.5 ml EP管中,加2 μl RNase Inhibitor,再分别加2 μg Biotin 标记的正义及反义对照 8.2如用于质谱
蛋白
组检测,增加细胞至10盘 (10 cm 细胞培养皿),Biotin-
RNA
正义/反义 各10 μg,streptavidin-beads 各100 μl。 C煮样5-10 min,用于后 续Western Blot检测目标
蛋白
。 在操作过程中要注意穿戴好干净的口罩、
利用体外合成带生物素标记的RNA富集细胞裂解液 中与之互作的蛋白的方法
A Method for Purifying RNA Interacting Proteins from Cell Lysates by Using in vitro Synthesized Biotin-labeled RNA
Authors:
朱林
王会丽
,
王栋
and
date:
09/27/2022,
view:
1858,
Q&A:
0
研究背景随着对
RNA
功能研究的深入,人们发现许多
RNA
通过结合特定的
蛋白
质并影响其结构和功能来发挥作用。所以,鉴定
RNA
结合
蛋白
能够帮助我们更好地研究
RNA
的功能。 而
RNA
与靶
蛋白
质的相互作用时,很大程度上依赖于
RNA
的正确的结构状态,所以在进行
RNA
与
蛋白
孵育前,须先经过
RNA
复性这一步。 四、 Western blot实验验证
RNA
与
蛋白
质
利用RNA免疫共沉淀以及RT-qPCR实验验证MDA-MB-231-LM2细胞中LDHA蛋白与非编码RNA LINC00973的相互作用
Detecting the Interaction between non-coding RNA LINC00973 and LDHA Protein in MDA-MB-231-LM2 Cells by RNA Immunoprecipitation and RT-qPCR
Authors:
朱林
王会丽
,
王栋
and
date:
09/27/2022,
view:
1637,
Q&A:
0
相比于其他基于
蛋白
去鉴定
互
作
RNA
的技术,如CLIP-seq等,RIP实验具有实验流程短、操作简便易上手、花费少等优点,是我们研究
蛋白
质与
RNA
互
作
常用的技术。 通过靶
蛋白
的特异性抗体,我们可以将结合在靶
蛋白
上的
RNA
与靶
蛋白
和抗体一同沉淀下来。之后收集沉淀物,再消化去除
蛋白
质,便可得到靶
蛋白
结合的
RNA
。 研究背景随着对
剪接因子SRSF7和mRNA的相互作用测试
The Interaction Detection between Serine/arginine-rich Splicing Factor 7 and mRNA
Authors:
侯敬丽
陈红
and
date:
05/15/2024,
view:
874,
Q&A:
0
... SPR检测技术具有实时检测、高效快速、亲和力测试动态范围宽等特点,可以获得
RNA
与
蛋白
之间亲和力常数等全面的
互
作
信息。 运行结束后,结果表明(1)ssRNA或ssRNA-m6A和500nM SRSF7
蛋白
互
作
时的结合响应满足测试需求,因此用500 nM SRSF7
蛋白
2倍梯度稀释,共9个浓度点。 图1 Biacore 8k检测SRSF7
蛋白
与ssRNA和ssRNA-m6A
互
作
的亲和力和动力学
水稻根系互作功能微生物的筛选方法
Screening Method of Functional Microorganisms Interacting with Rice Roots
Authors:
赵金彤
刘晓青
,
韩东飞
,
伍宁丰
,
田健
and
date:
04/27/2021,
view:
3797,
Q&A:
0
水稻功能内生微生物的筛选及其与水稻
互
作
降低镉胁迫效应的研究. 暨南大学.Andrews, J. M. (2001). 功能微生物提高水稻抗镉胁迫能力的应用4.1组培管实验 使用组培管进行水稻幼苗的培养,实验周期为14 d左右,可以在较短时间内高通量地初步筛选与水稻根系
互
作
后部分解除镉胁迫的菌株 (Jan et al. 可确定其菌属相似性) 来分析菌株的菌属类别,根据农业农村部微生物肥料和食用菌菌种质量监督检验测试中心公布的《菌种安全等级调整目录及依据》,选择评定等级为1级 (免做毒理学试验) 的安全菌株进行水稻与微生物
2021年–2023年《Nature》&《Science》&《Cell》期刊论文中SPR技术应用统计
Overview of the Application of SPR Technology in Nature, Science and Cell Journal Publications from 2021 to 2023
Authors:
刘伟
兰姝珏
,
陈铭
and
date:
05/20/2025,
view:
931,
Q&A:
0
... 该统计结果提示,在进行
蛋白
与
蛋白
互
作
亲和力检测时,HBS-EP+可以作为实验所需运行缓冲液的首选;而针对
蛋白
与小分子的
互
作
特征研究而言,两种缓冲液都可考虑作为运行缓冲液。 SPR技术研究
蛋白
与小分子
互
作
的特性(图3)。 在33例采用单循环动力学模式的研究对象中,四分之三为针对抗原抗体亲和力表征,5例为受体与
蛋白
亲和力表征,3例为
蛋白
与小分子
互
作
动物微生物单细胞转录组分析工具:现状与未来发展方向
Authors:
赵李頔涵
房楠楠
,
王恺毅
,
王海燕
,
闫利平
,
高云云
and
date:
11/25/2025,
view:
257,
Q&A:
0
... 下游分析包括聚类、批次效应矫正、功能簇识别、细胞
互
作
、伪时间轨迹和功能富集。 微生物单细胞
互
作
分析依赖于功能注释和物种标注的精确性。例如 MscT 使用SPIEC-EASI构建稀疏逆协方差网络,识别生态关联,并通过Gephi可视化 细胞单位间的交互。 ,结合SortMeRNAv4.3.4 [93]、STAR、featureCounts、UMI-tools构建矩阵,Seurat v4进行聚类,最终用blastnv2.12.0[94] 预测宿主-噬菌体
互
作
高质量基因矩阵导入Seur